微小毛霉凝乳酶的酶学性质研究

doi:10.7506/spkx1002-6300-201003042

食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (3): 185-188.doi: 10.7506/spkx1002-6300-201003042

微小毛霉凝乳酶的酶学性质研究

高维东^1,2，甘伯中^1,*，丁福军²，张玉平²，朱雄英²，纪银莉²

1.甘肃农业大学食品科学与工程学院 2.甘肃华羚生物技术研究中心

收稿日期:2008-12-23 出版日期:2010-02-01 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 高维东 E-mail:wdgao1105@126.com
基金资助:
甘肃省农业生物技术专项项目(GNSW-2006-14) 甘肃省科技重大专项项目(0702NKDA034)

Enzymatic Properties of Chymosin from Mucor pusillus

GAO Wei-dong1,2 GAN Bo-zhong1,* DING Fu-jun2 ZHANG Yu-ping2 ZHU Xiong-ying2 JI Yin-li2

1. College of Food Science and Engineering, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China
2. Gansu Hualing Biotechnology Research Center, Lanzhou 730000, China

Received:2008-12-23 Online:2010-02-01 Published:2010-12-29
Contact: GAO Wei-dong E-mail:wdgao1105@126.com

摘要/Abstract

摘要：

目的：研究微小毛霉(HL-1)凝乳酶的酶学性质。方法：研究了酶的最适温度，酶的pH值稳定性和热稳定性，探讨了金属离子、化学物质和钙离子对酶活力的影响，加酶量对酶反应的影响，测定了酶的蛋白水解活力、相对分子量和酶的Km与Vm值。结果：酶的最适温度为60℃；最适pH值为5.5；酶在65℃保温5min活力损失95%；钙离子是酶的激活剂，其含量与酶活力正相关，而钾离子则对酶有抑制作用；氯化钠对酶活力的影响不大，但是SDS可导致酶严重失活；加酶量与反应时间成反比；酶的蛋白水解活力为485.3U/g；相对分子质量是42000，Km为0.02380mol/L，Vm为1.1227mg/min。结论：得出了微小毛霉(HL-1)凝乳酶的酶学性质。

关键词: 微小毛霉(HL-1), 凝乳酶, 酶学性质

Abstract:

To study enzymatic properties of chymosin from Mucor pusillus (HL-1), the optimal temperature, pH and thermal stability of chymosin were investigated. Along with this, the effects of metal ions, chemical materials, calcium ions and enzyme amount on the activity of the enzyme were examined, and the proteolytic activity, relative molecular weight, Km and Vm of the enzyme were measured. The optimal reaction temperature and pH of the enzyme was 60 ℃ and 5.5. Incubation at 65 ℃ for 5 min resulted in 95% loss of enzyme activity. Calcium ion, an enzyme activator, could improve the enzyme activity in a concentration-dependent manner; in contrast, potassium ion was an inhibitor of the enzyme. Sodium chloride did not affect the enzyme activity, but SDS led to the severe inactivation of the enzyme. Meanwhile, a negative relationship between enzyme amount and reaction time was observed. The proteolytic activity, relative molecular mass, Km and Vm of the enzyme were 485.3 U/g, 42000, 0.0238 mol/L and 1.1227 mg/min, respectively.

Key words: Mucor pusillus (HL-1), chymosin, enzymatic properties

中图分类号:

Q814

高维东1,2，甘伯中1,*，丁福军2，张玉平2，朱雄英2，纪银莉2. 微小毛霉凝乳酶的酶学性质研究[J]. 食品科学, 2010, 31(3): 185-188.

GAO Wei-dong1,2 GAN Bo-zhong1,* DING Fu-jun2 ZHANG Yu-ping2 ZHU Xiong-ying2 JI Yin-li2. Enzymatic Properties of Chymosin from Mucor pusillus[J]. FOOD SCIENCE, 2010, 31(3): 185-188.

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