蜜蜂α-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究

食品科学 ›› 2007, Vol. 28 ›› Issue (7): 304-308.

蜜蜂α-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究

王志江, 魏红福

浙江万里学院生物与环境学院；西南科技大学生命科学与工程学院浙江宁波315100；四川绵阳621010；

出版日期:2007-07-15 发布日期:2011-10-24

Purification and Characterization of α-glucosidase Extracted from Honey Bee

WANG Zhi-Jiang, WEI Hong-Fu

1.College of Biological and Environment Sciences, Zhejiang Wanli University, Ningbo 315100, China; 2.College of Life Science and Engineering, Southwest University of Science and Technology, Mianyang 621010, China

Online:2007-07-15 Published:2011-10-24

摘要/Abstract

摘要： 本研究以蜜蜂腹部为材料,通过研磨进行组织破碎,然后硫酸铵沉淀、High Q离子交换层析、疏水作用层析和Superdex G-75凝胶层析,得到的α-葡萄糖苷酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带,分子量约为55kDa。以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,研究酶催化反应动力学,结果表明:α-葡萄糖苷酶的最适反应pH范围为5.0～6.0,而pH稳定性范围为5.0～10.0。该α-葡萄糖苷酶的热稳定性比较差。其最适反应温度范围在35～45℃内。Zn2+、Mg2+、Mn2+和Fe2+对α-葡萄糖苷酶有激活作用。而Cu2+和Co2+对α-葡萄糖苷酶有抑制作用。酶动力学参数Km和Vmax分别为0.183mmol/L和0.085μmol/min·mg。

关键词: , 蜜蜂, &alpha, -葡萄糖苷酶, 纯化, 稳定性, 动力学

Abstract: In this paper, α-glucosidase was purified to electrophoresis degree after being extracted from honey bee abdomen with ammonium sulfate precipitation, with High Q chromatography, hydrophobic interaction chromatography and Superdex G- 75 chromatography. Its relative molecular weight is determined to be around 55 kDa by SDS-PAGE. The optimal temperature and pH range are 35～45 ℃ and 5.0～6.0, respectively, but the temperature stability is poor. The pH stability range is 5.0～ 10.0. Zn2+, Mg2+, Mn2+ and Fe2+ can activate the enzyme, however, Cu2+ and Co2+ can cause inhibition, and glucose is also a strong inhibitor. The Vmax value is 0.085 μmol/min·mg and the Km value is 0.183 mmol/L for p-Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside(PNPG).

Key words: honey bee； &alpha, -glucosidase； purification； stability； kinetics；

王志江, 魏红福. 蜜蜂α-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究[J]. 食品科学, 2007, 28(7): 304-308.

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