基于可视化抗体宏阵列技术的出血性大肠杆菌O157∶H7定量检测

doi:10.7506/spkx1002-6630-201420037

食品科学

基于可视化抗体宏阵列技术的出血性大肠杆菌O157∶H7定量检测

李浩林1,2，刘箐2，刘芳3，董庆利2，邱实2，杨玉萍2，郭慧琴4，韩舜愈1,*

1.甘肃农业大学食品科学与工程学院，甘肃兰州 730070；2.上海理工大学医疗器械与食品学院，上海 200093；
3.甘肃出入境检验检疫局，甘肃兰州 730000；4.上海慧耘生物科技有限公司，上海 200437

出版日期:2014-10-25 发布日期:2014-11-07
基金资助:
国家质检总局科技项目（GSCIQ_2010IK220）；上海市科委重点支撑项目（13430502400）；
甘肃省科技支撑计划项目（1304FKCA056）

Quantitative Detection of Escherichia coli O157:H7 Based on Visual Antibody Macroarray Technology

LI Hao-lin1,2, LIU Qing2, LIU Fang3, DONG Qing-li2, QIU Shi2, YANG Yu-ping2, GUO Hui-qing4, HAN Shun-yu1,*

1. College of Food Science and Engineering, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China;
2. School of Medical Instrument and Food Engineering, University of Shanghai for Science and Technology, Shanghai 200093, China;
3. Gansu Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Lanzhou 730000, China;
4. Shanghai Prajan Bioiogy Technology Company, Shanghai 200437, China

Online:2014-10-25 Published:2014-11-07

摘要/Abstract

摘要：

目的：探索建立一种新的出血性大肠杆菌O157∶H7（Escherichia coli O157∶H7）的快速定量检测技术。方法：以硝酸纤维素膜为基片，用生物芯片点样仪制作抗体宏阵列，采用“双抗夹心”原理，对出血性大肠杆菌O157∶H7进行定量检测研究。结果：本方法对出血性大肠杆菌O157∶H7的检出限为3.4×105 CFU/mL，在105～107CFU/mL细菌浓度范围内，宏阵列的灰度值与细菌浓度之间有较好的线性关系。该方法可在2.5 h内同步检测多个样品中出血性大肠杆菌O157∶H7的浓度。结论：通过用标准菌株、模拟带菌等研究显示，用宏阵列技术快速定量检测出血性大肠杆菌O157∶H7，结果肉眼可见，稳定准确，同时操作简便、成本低廉、无需大型设备，制作好的抗体宏阵列可用于快速评估食品中出血性大肠杆菌O157∶H7的污染状况，尤其适合于基层实验室进行快速高通量样品筛查。

关键词: 出血性大肠杆菌O157∶H7, 抗体宏阵列, 可视化, 定量检测

Abstract:

Purpose: To establish a new rapid quantitative assay for detecting Escherichia coli O157:H7. Methods: Using
nitrocellulose membrane as substrate, an antibody macroarray was fabricated with a biochip spotting robot, and then a
double antibody sandwich method was developed for quantitative detection of E. coli O157:H7. Results: The limit of
detection (LOD) for E. coli O157:H7 was 3.4 × 105 CFU/mL, and a good linear relationship was observed between grey
value for the macroarray and bacterial concentration in the range of 105–107 CFU/mL. This method could allow simultaneous
determination of different concentrations of E. coli O157:H7 in multiple samples. Conclusions: As evaluated by applying
it to standard strains and simulated enrichment culture, the antibody macroarray-based method could provide stable and
accurate results visible to naked eyes with simple operation and low costs without the use of large equipment. Moreover, the
antibody macroarray developed in this study could be used to rapidly assess E. coli O157:H7 pollution in food, especially
suitable for rapid screening of samples in grassroots-level laboratories.

Key words: Escherichia coli O157:H7, antibody macroarray, visualization, quantitative determination

中图分类号:

Q939.91

李浩林1,2，刘箐2，刘芳3，董庆利2，邱实2，杨玉萍2，郭慧琴4，韩舜愈1,*. 基于可视化抗体宏阵列技术的出血性大肠杆菌O157∶H7定量检测[J]. 食品科学, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201420037.

LI Hao-lin1,2, LIU Qing2, LIU Fang3, DONG Qing-li2, QIU Shi2, YANG Yu-ping2, GUO Hui-qing4, HAN Shun-yu1,*. Quantitative Detection of Escherichia coli O157:H7 Based on Visual Antibody Macroarray Technology[J]. FOOD SCIENCE, doi: 10.7506/spkx1002-6630-201420037.

[1]	杨梅，翟晓东，黄晓玮，李崎，邹小波. 嗅觉可视化技术对啤酒品质的快速检测[J]. 食品科学, 2021, 42(18): 225-231.
[2]	姜毓君，杨涛，满朝新，周文琦，王蕊，陈思涵，杨鑫焱，付世骞，高平娉，任玉伟，张微. 免疫磁分离和可视化金纳米杂交探针法快速检测婴幼儿配方乳粉中的阪崎克罗诺杆菌[J]. 食品科学, 2021, 42(16): 224-232.
[3]	苑宁，张蕴哲，张海娟，于泽，卢鑫，张伟. 可视化跨越式滚环扩增技术检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌[J]. 食品科学, 2021, 42(16): 239-245.
[4]	胡家勇，张嫚，皮江一，彭青枝，冯灏，周陶鸿. 表面增强拉曼光谱法定性定量检测保健食品中非法添加物西地那非[J]. 食品科学, 2020, 41(8): 297-302.
[5]	盖圣美，张中会，游佳伟，邹玉峰，刘登勇. 低场核磁共振技术结合化学计量学方法定性、定量检测注水猪肉[J]. 食品科学, 2020, 41(4): 243-247.
[6]	孙宗保，梁黎明，闫晓静，邹小波，王天真，刘小裕，李君奎. 基于高光谱成像技术的进口冰鲜牛肉新鲜度指标检测[J]. 食品科学, 2020, 41(22): 315-323.
[7]	邵航, 宋英华, 李墨潇, 邵伟, 雷生姣, 库任俊, 夏亚琼. 我国食品安全与数据科学交叉研究的科学计量学分析[J]. 食品科学, 2020, 41(13): 291-301.
[8]	徐蕾蕊，马丹，魏咏新，李丹，魏海燕，刘莉，张西萌，汪琦，付溥博，赵晓娟，曾静. A群轮状病毒一步法RT-ddPCR方法的建立[J]. 食品科学, 2020, 41(12): 292-297.
[9]	杨佳，刘强，赵楠，陈继昆，彭菁，潘磊庆，屠康. 基于高光谱成像的干燥胡萝卜片水分及类胡萝卜素含量无损检测和可视化分析[J]. 食品科学, 2020, 41(12): 285-291.
[10]	苏晨丽，陈兰明. 副溶血性弧菌毒素编码基因的微量、可视化检测[J]. 食品科学, 2020, 41(10): 288-296.
[11]	白京，李家鹏，邹昊，田寒友，刘飞，李文采，王辉，张振琪，王守伟. 近红外光谱定性定量检测牛肉汉堡饼中猪肉掺假[J]. 食品科学, 2019, 40(8): 287-292.
[12]	郭建平，万佳佳，陆兆新，吕凤霞，张充，赵海珍，别小妹. 基于可视化环介导等温扩增技术快速检测金黄色葡萄球菌[J]. 食品科学, 2019, 40(20): 325-331.
[13]	严松，林颢. 基于嗅觉可视化技术和气相色谱-质谱联用鉴别霉变小麦[J]. 食品科学, 2019, 40(2): 275-280.
[14]	沈飞，刘潇，裴斐，李彭，姜大峰，刘琴. ATR-FTIR在小麦及其制品呕吐毒素污染水平快速测定中的应用[J]. 食品科学, 2019, 40(2): 293-297.
[15]	白京，李家鹏，邹昊，田寒友，刘飞，王辉，李文采，张振琪，王守伟. 近红外特征光谱定量检测羊肉卷中猪肉掺假比例[J]. 食品科学, 2019, 40(2): 287-292.

基于可视化抗体宏阵列技术的出血性大肠杆菌O157∶H7定量检测

Quantitative Detection of Escherichia coli O157:H7 Based on Visual Antibody Macroarray Technology

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价