免疫磁分离和可视化金纳米杂交探针法快速检测婴幼儿配方乳粉中的阪崎克罗诺杆菌

doi:10.7506/spkx1002-6630-20200529-355

食品科学 ›› 2021, Vol. 42 ›› Issue (16): 224-232.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20200529-355

免疫磁分离和可视化金纳米杂交探针法快速检测婴幼儿配方乳粉中的阪崎克罗诺杆菌

姜毓君，杨涛，满朝新，周文琦，王蕊，陈思涵，杨鑫焱，付世骞，高平娉，任玉伟，张微

（东北农业大学食品学院，乳品科学教育部重点实验室，黑龙江哈尔滨 150030）

发布日期:2021-08-27
基金资助:
国家自然科学基金面上项目（31871828）

Rapid Detection of Cronobacter sakazakii in Powdered Infant Formula by Immunomagnetic Separation Coupled with Visual Nanogold Hybridization Probe

JIANG Yujun, YANG Tao, MAN Chaoxin, ZHOU Wenqi, WANG Rui, CHEN Sihan, YANG Xinyan, FU Shiqian, GAO Pingping, REN Yuwei, ZHANG Wei

(Key Lab of Dairy Science, Ministry of Education, College of Food Science, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China)

Published:2021-08-27

摘要/Abstract

摘要： 利用免疫磁分离和金纳米杂交探针策略，开发一种快速和灵敏的可视化检测婴幼儿配方乳粉（powdered infant formula，PIF）中阪崎克罗诺杆菌（Cronobacter sakazakii）方法。抗体功能化的磁颗粒捕获C. sakazakii，金纳米探针对聚合酶链式反应的产物进行分析，这种探针法可以替代传统的电泳。免疫磁颗粒是由100?μL磁颗粒、120?μL碳化二亚胺盐酸盐、80?μL?C.?sakazakii单克隆抗体和体积分数0.02%的吐温-20制备。特异性检测中仅有C.?sakazakii是阳性结果。在纯培养基和不经预富集的人工污染PIF中，分别能检测到102?CFU/mL和103?CFU/g的C.?sakazakii。经过3?h的预富集，此方法可以在PIF中检测到低至4.5×101 CFU/g的C. sakazakii。可视化检测、电泳和紫外扫描光谱结果一致。因此，免疫磁分离和金纳米探针的方法可以替代凝胶电泳，对于快速检测C. sakazakii具有重要的意义。此方法将有助于检测PIF样本的C. sakazakii。

关键词: 阪崎克罗诺杆菌；免疫磁分离；金纳米颗粒；婴幼儿配方乳粉；可视化检测

Abstract: A rapid and sensitive assay for detecting Cronobacter sakazakii in powdered infant formula (PIF) was developed by utilizing immunomagnetic separation (IMS) combined with visual gold nanoparticle (GNP) hybridization probe. C. sakazakii was captured via antibody-functionalized magnetic particles (MPs) and the polymerase chain reaction amplicon of the target bacteria was analyzed by GNP instead of traditionally used electrophoresis. Immunomagnetic particles (IMPs) were obtained by mixing together 100 μL of MPs, 120 μL of carbodiimide hydrochloride (EDC) and 80 μL of monoclonal antibody against C. sakazakii with 0.02% (V/V) added Tween-20. Specificity test showed positive results only for C. sakazakii. C. sakazakii could be detected at 102 CFU/mL and 103 CFU/g in pure culture and artificially contaminated PIF without pre-enrichment, respectively. After 3 h of pre-enrichment, this assay was able to detect as low as 4.5 × 101 CFU/g of C. sakazakii in PIF. The results of the visual assay were consistent with those of electrophoresis and ultraviolet scanning spectroscopy. Therefore, the IMS-GNP probe assay proved to be an alternative to gel electrophoresis for the rapid detection of C. sakazakii in PIF samples.

Key words: Cronobacter sakazakii; immunomagnetic separation; gold nanoparticles; powdered infant formula; visual detection

中图分类号:

TS252.7

姜毓君，杨涛，满朝新，周文琦，王蕊，陈思涵，杨鑫焱，付世骞，高平娉，任玉伟，张微. 免疫磁分离和可视化金纳米杂交探针法快速检测婴幼儿配方乳粉中的阪崎克罗诺杆菌[J]. 食品科学, 2021, 42(16): 224-232.

JIANG Yujun, YANG Tao, MAN Chaoxin, ZHOU Wenqi, WANG Rui, CHEN Sihan, YANG Xinyan, FU Shiqian, GAO Pingping, REN Yuwei, ZHANG Wei. Rapid Detection of Cronobacter sakazakii in Powdered Infant Formula by Immunomagnetic Separation Coupled with Visual Nanogold Hybridization Probe[J]. FOOD SCIENCE, 2021, 42(16): 224-232.

[1]	冯春雷鲁丁强庞广昌. G蛋白偶联雌激素受体在乳制品雌激素检测中的应用潜力[J]. 食品科学, 0, (): 0-0.
[2]	杨艳歌李莉王丹丹李唯熙王洪越刘鸣畅吴亚君. 多重实时荧光PCR技术快速鉴别特种乳中的乳源动物成分[J]. , 0, (): 0-0.
[3]	姜毓君杨涛满朝新周文琦王蕊陈思涵杨鑫焱付世骞高平娉任玉伟张微. 免疫磁分离和可视化金纳米杂交探针法快速检测婴幼儿配方乳粉中的阪崎克罗诺杆菌[J]. 食品科学, 0, (): 0-0.
[4]	郭美娟史国华张斌李杨薇宇张岩张兰天. 国标方法检测特殊医学用途婴儿配方食品中部分B族维生素的基质适用性[J]. , 0, (): 0-0.
[5]	郭美娟，史国华，张斌，李杨薇宇，张岩，张兰天. 国标方法检测特殊医学用途婴儿配方食品中部分B族维生素的基质适用性[J]. 食品科学, 2021, 42(12): 268-274.
[6]	张鹏飞王新. 羊奶粉生产环节中金黄色葡萄球菌分离鉴定及其分子特性和耐药性检测[J]. , 0, (): 0-0.
[7]	张鹏飞，付雪婷，赵春花，刘心雨，张杰，张萌，寇明莹，葛武鹏，王新. 羊奶粉生产中金黄色葡萄球菌分离鉴定及其分子特性和耐药性检测[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 291-297.
[8]	王象欣魏雪冬李文斌鄂来明单艺姜毓君. 磺基甜菜碱型两性离子亲水相互作用色谱法测定婴幼儿配方乳粉中核苷酸的含量[J]. , 0, (): 0-0.
[9]	王象欣，单艺，魏雪冬，李文斌，鄂来明，姜毓君. 超高效液相色谱-紫外检测法测定婴幼儿配方乳粉中的核苷酸含量[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 254-262.
[10]	唐烁胡雪段国霞刘丽君李翠枝吕志勇. 乳及乳制品中磷脂的含量、功能、分离及检测技术研究进展[J]. 食品科学, 0, (): 0-0.
[11]	王亚，高红波，隋海霞，仇凯，钟其顶，吕晓玲. 同位素内标-气相色谱-质谱法同时测定婴幼儿配方粉中3-氯丙醇酯和缩水甘油酯的含量[J]. 食品科学, 2020, 41(4): 262-267.
[12]	宗婧，黄志轩，陈晓宇，陈达. 基于改进光谱角制图算法的乳粉安全非定向筛查新方法[J]. 食品科学, 2020, 41(2): 315-320.
[13]	宗婧黄志轩陈晓宇陈达. 基于改进光谱角制图算法的乳粉安全非定向筛查新方法[J]. 食品科学, 0, (): 0-0.
[14]	朱俊亚，李芳，赵兰馨，李席席，刘云宏. 纳米磁珠-电化学适配体传感技术检测牛奶中氨苄青霉素[J]. 食品科学, 2019, 40(24): 294-299.
[15]	朱俊亚李芳赵兰馨李席席刘云宏. 纳米磁珠-电化学适配体传感技术检测牛奶中氨苄青霉素[J]. 食品科学, 0, (): 0-0.

免疫磁分离和可视化金纳米杂交探针法快速检测婴幼儿配方乳粉中的阪崎克罗诺杆菌

Rapid Detection of Cronobacter sakazakii in Powdered Infant Formula by Immunomagnetic Separation Coupled with Visual Nanogold Hybridization Probe

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价