食品科学 ›› 2023, Vol. 44 ›› Issue (8): 317-323.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20220406-056
范维, 高晓月, 李贺楠, 董雨馨, 刘虹宇, 李宇轩, 郭文萍
FAN Wei, GAO Xiaoyue, LI Henan, DONG Yuxin, LIU Hongyu, LI Yuxuan, GUO Wenping
摘要: 建立一种同时快速检测驴、马、猪及鸭源性成分的四重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。分别以4 种源性成分的Nad5、ATpase6、ATP8、cytb基因为靶基因设计特异性引物和TaqMan探针,以18S rRNA基因为内参基因,建立多重real-time PCR方法,并对该方法进行方法学验证,同时对不同掺入比例模拟样品、不同加工工艺模拟样品和实际驴肉样品进行检测。结果显示,该方法具有高通量、特异性强、灵敏度高等优点。当Ct值≤35.0时,方法对16 种非目标源性具有良好特异性;灵敏度可检测到质量浓度为2×10-4 ng/μL的模板DNA;对生肉的检出限为肉含量的0.001%,对熟肉制品的检出限为肉含量的0.01%;对100 份实际样品进行检测,结果与标准方法一致,说明建立的多重real-time PCR法可用于肉及肉制品中常见掺假源性成分的检测。
中图分类号: