食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (23): 151-156.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201023035
高兆建,侯进慧,孙会刚,刁进进
GAO Zhao-jian,HOU Jin-hui,SUN Hui-gang,DIAO Jin-jin
摘要:
为从嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)XG24 发酵液中纯化到β- 半乳糖苷酶,并对酶学性质进行研究,利用硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析和Sephadex G-75 分子筛凝胶过滤层析等方法进行分离纯化。结果表明:经过系列步骤纯化后,酶纯度提高了54.5 倍,回收率20.4%,酶比活力达32.7U/mg。以邻- 硝基酚-D- 半乳糖吡喃糖苷(ONPG)为底物,研究β- 半乳糖苷酶的酶学性质。最适pH6.5,最适作用温度65℃。此菌株产β- 半乳糖苷酶在70℃以下和pH4.0~8.0 范围内具有较好的稳定性;Mg2+、Mn2+、Fe2+和Co2+ 对此酶有明显激活作用,而Cu2+、Ag+、Hg2+ 几乎完全抑制酶活性。以ONPG 为底物酶的Km 值为4.32mmol/L。SDS-PAGE 和凝胶过滤层析测得酶蛋白为单肽链蛋白,表观分子质量64kD。因此,嗜热脂肪芽孢杆菌XG24 β- 半乳糖苷酶在乳制品工业中具有潜在的应用价值。
中图分类号: