凝乳酶的基因克隆、序列分析及初步表达

食品科学 ›› 2005, Vol. 26 ›› Issue (7): 58-63.

凝乳酶的基因克隆、序列分析及初步表达

邱重晏, 徐敏, 王正祥

江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室

出版日期:2005-07-15 发布日期:2011-09-19

Molecular Cloning, Sequence Analysis and Primary Expression of Mucor pusillus DNA

QIU Zhong-Yan, XU Min, WANG Zheng-Xiang

The Key Laboratory of Industrial Biology, School of Biotechnology, Southern Yangtze University

Online:2005-07-15 Published:2011-09-19

摘要/Abstract

摘要： PCR扩增得到微小毛霉凝乳酶结构基因并测定其核苷酸序列,用DNAman软件分析其核苷酸序列及推衍得到的多肽序列,结果表明扩增得到的片段为凝乳酶基因。构建了重组菌Pichia pastoris KM71/PIC9K-mcp,通过G418抗性筛选得到具有多拷贝基因的整合重组菌MK3。用甲醇诱导进行初步发酵试验,测得重组菌MK3酶活为5.4U/ml。

关键词: 凝乳酶, 克隆, 序列分析, 重组菌, 表达

Abstract: In this paper, rennin gene was amplified from Mucor pusillus and sequenced. The nucleic acid sequence and amino-acid sequence encoded by the gene were compared using DNAman biological software. Results showed that amplified fragmentwas a novel rennin gene(mcp). re-combination Pichia pastoris KM71/PIC9K-mcp was constructed successfully and obtained amulti-copied integrated strain of MK3 by resistant screening (G418). Initial fermation experiments were carried out andmethanol was used as sole carbon source. The enzyme activity of re-combination MK3 was 5.4U/ml in above condition.

Key words: rennin, clone, sequence analysis, re-combination strain, express

邱重晏, 徐敏, 王正祥. 凝乳酶的基因克隆、序列分析及初步表达[J]. 食品科学, 2005, 26(7): 58-63.

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