酶联免疫吸附法检测动物源性食品中恩诺沙星残留量

doi:10.7506/spkx1002-6630-201708037

食品科学 ›› 2017, Vol. 38 ›› Issue (8): 239-243.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201708037

酶联免疫吸附法检测动物源性食品中恩诺沙星残留量

杨熠，孟坤杰，赵红琼，米克热木·沙衣布扎提，张小莺,

1.新疆农业大学动物医学学院，新疆乌鲁木齐 830052；2.西北农林科技大学动医学院，陕西杨凌 712100

出版日期:2017-04-25 发布日期:2017-04-24
基金资助:
国家自然科学基金面上项目（31572556）；2016年度国家外国专家局国文教专家聘请计划学校重点项目（X2015017）；中国-上合组织国家动物疫病与动物源性食品安全检测创新平台项目（2016E03012）

ELISA Determination of Enrofloxacin

YANG Yi, MENG Kunjie, ZHAO Hongqiong, Mikeremu·SHAYIBUZHATI, ZHANG Xiaoying,

1. College of Veterinary Medicine, Xinjiang Agricultural University, ürümqi 830052, China; 2. College of Veterinary Medicine, Northwest A&F University, Yangling 712100, China

Online:2017-04-25 Published:2017-04-24

摘要/Abstract

摘要： 为检测动物源性食品中恩诺沙星残留量，评估基于卵黄抗体的间接竞争酶联免疫吸附法检测恩诺沙星的可行性，用活性脂法将恩诺沙星同卵清蛋白偶联制备免疫原和包被抗原并用紫外光谱进行验证。用聚乙二醇-6000提取卵黄抗体。五免之后效价达到峰值1∶32 000。用间接竞争酶联免疫吸附法确定包被原质量浓度、卵黄抗体的稀释倍数和IC50分别为38 ng/mL、1∶64 000和18.207 ng/mL，回归曲线方程为y=0.891 1－0.016 5x（R2=0.990）。结果表明，制备的抗恩诺沙星卵黄抗体为进一步建立检测动物源性食品中恩诺沙星的残留的免疫方法提供参考依据。

关键词: 恩诺沙星, 卵黄抗体, 药物残留, 酶联免疫吸附法

Abstract: An indirect competitive enzyme-linked immunosorbent immunoassay (ic-ELISA) based on chicken IgY was developed and validated for the detection of enrofloxacin (ENR) residues in animal-derived food samples. The ENR immunogen and coating antigen were prepared by the active ester method and confirmed by UV spectroscopy for further detection and immunization into laying hens. IgY antibodies were extracted with PEG-6000 precipitation. The titer of anti- ENR IgY attained its peak (1:32 000) after the fifth booster immunization. Checkerboard titration showed that 1:64 000 dilution of anti-ENR IgY could give OD around 1.0 at 38 ng/mL ENR-OVA coating concentration. The IC50 of the ELISA for ENR was 18.207 ng/mL and the regression curve equation was y = 0.891 1?0.016 5x (R2 = 0.990). The study demonstrated that anti-ENR IgY antibody was feasible for the detection of ENR in animal-derived food samples.

Key words: enrofloxacin, IgY, antibiotic residues, indirect competitive enzyme-linked immunosorbent immunoassay (ic-ELISA)

中图分类号:

S859.79

杨熠，孟坤杰，赵红琼，米克热木·沙衣布扎提，张小莺,. 酶联免疫吸附法检测动物源性食品中恩诺沙星残留量[J]. 食品科学, 2017, 38(8): 239-243.

YANG Yi, MENG Kunjie, ZHAO Hongqiong, Mikeremu·SHAYIBUZHATI, ZHANG Xiaoying,. ELISA Determination of Enrofloxacin[J]. FOOD SCIENCE, 2017, 38(8): 239-243.

[1]	刘若冰，郝怡环，杨茜，焦文雅，王向红. 基于核酸适配体的AccuBlue荧光法检测动物食品中的恩诺沙星[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 310-315.
[2]	邱涛涛，徐振林，甘庆庆，王兰腾，沈兴，李向梅，孙远明，雷红涛. 卵黄抗体体内代谢及中和毒素研究进展[J]. 食品科学, 2019, 40(5): 303-308.
[3]	钟欣欣，曹立民，林洪，史佩玉，隋建新. 酪氨酸酶特异性卵黄抗体Fab’片段的制备及其对酶活力的抑制性能[J]. 食品科学, 2018, 39(2): 119-123.
[4]	史佩玉，曹立民，林洪，隋建新. 表面等离子体共振技术分析卵黄抗体对酪氨酸酶与底物相互作用的影响[J]. 食品科学, 2018, 39(2): 158-162.
[5]	彭宏威，白瑞樱，陈殿，孙远明，徐振林，曾道平，李段，伍志权，杨金易. 响应面试验优化动物源性食品中呋喃西林代谢物ELISA检测的衍生条件[J]. 食品科学, 2017, 38(6): 287-294.
[6]	钱卓真，汤水粉，罗方方，王丽娟，位绍红. 石斑鱼中阿维菌素类药物多残留测定及食用安全风险评估[J]. 食品科学, 2017, 38(22): 309-316.
[7]	张鑫磊，隋建新，陈静，王笑笑，林洪，曹立民. 水产品中恩诺沙星胶体金免疫层析毛细管检测及其前处理[J]. 食品科学, 2017, 38(22): 322-329.
[8]	伍伟健，董洁娴，饶美芳，詹屋强，王弘，孙远明. 抗孔雀石绿单链抗体-碱性磷酸酶融合表达和活性鉴定[J]. 食品科学, 2016, 37(17): 121-126.
[9]	刘金，王丽威，岳喜庆. 牛初乳中免疫球蛋白G双抗夹心ELISA检测方法的建立[J]. 食品科学, 2016, 37(14): 74-79.
[10]	张成博，李兆周，侯玉泽*，李道敏，李松彪，李志康，张小帆，张腊梅，吕璞. 分子印迹技术在药物残留检测中的应用[J]. 食品科学, 2014, 35(9): 323-328.
[11]	丁丽1,2，曾绍东2，魏晓奕1，王明月2,李积华1,*，程盛华1,2. 超高效液相色谱-质谱法测定豆芽中多菌灵、2,4-二氯苯氧乙酸、恩诺沙星残留[J]. 食品科学, 2014, 35(22): 169-175.
[12]	胡祥娜1，顾亚萍1,*，林慧纯1，王瑞1，方长发2. 高效液相色谱串联四极杆质谱法同时测定豆芽中7 种药物残留[J]. 食品科学, 2014, 35(20): 253-257.
[13]	刘小鸣，冯仕云，周颖喆，田丰伟，赵建新，张灏，陈卫. 荧光法结合化学计量学法快速检测牛乳中恩诺沙星残留[J]. 食品科学, 2013, 34(22): 111-114.
[14]	易翠平1，苏芳1，陈永发1，彭新凯2，朱向荣3. 重金属镉单克隆抗体的制备与性质分析[J]. 食品科学, 2013, 34(21): 248-253.
[15]	刘玲，杨双华，纪淑娟，Leif Horsfelt SKIBSTED. 酶联免疫吸附结合荧光分析法测定乳粉加速贮藏过程中的褐变产物[J]. 食品科学, 2013, 34(18): 249-252.

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