食品科学 ›› 2011, Vol. 32 ›› Issue (4): 203-207.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201104045
易海华,祝长青,宋阳威,孙慧宇,房 超,王云飞,徐 波,吴萍兰,徐 政,徐继承,赵金伟
YI Hai-hua,ZHU Chang-qing,SONG Yang-wei,SUN Hui-yu,FANG Chao,WANG Yun-fei,XU Bo,WU Ping-lan,XU Zheng,XU Ji-cheng,ZHAO Jin-wei
摘要: 目的:建立一种快速、简单地检测食品中单增李斯特菌的环介导恒温基因扩增方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),并初步建立荧光定量LAMP检测单增李斯特菌的方法。方法:根据LAMP方法的原理,设计LAMP检测引物,建立LAMP检测方法,同时对方法的特异性、灵敏度、重复性及初始拷贝数的对数值与反应时间之间的线性关系进行评估。结果:使用LAMP引物可以在0.5h内完成检测工作;LAMP检测技术的灵敏度高出聚合酶链式反应检测技术100倍以上,检出限达到1.72×101拷贝/反应,与其他食源性致病菌无交叉反应,平均实验间变异系数小于5%;反应时间与初始模板浓度的常用对数值有良好的线性关系(R2=0.9994)。结论:本方法具有快速、灵敏、特异、操作简单、设备要求低的特点,具有广阔的应用前景。
中图分类号: