干酪乳杆菌LC2W原生质体的制备与再生

doi:10.7506/spkx1002-6630-201305035

食品科学 ›› 2013, Vol. 34 ›› Issue (5): 167-171.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201305035

干酪乳杆菌LC2W原生质体的制备与再生

黄茜1，杜昭平2，马成杰2，潘能庆1，刘蕾1，马爱民1,*

1.华中农业大学食品科学技术学院，湖北武汉 430070； 2.乳业生物技术国家重点实验室，光明乳业股份有限公司技术中心，上海 200436

收稿日期:2011-12-18 修回日期:2013-01-17 出版日期:2013-03-15 发布日期:2013-04-16
通讯作者: 马爱民 E-mail:maaimin@yahoo.com
基金资助:
“973”计划项目

Protoplast Preparation and Regeneration of Lactobacillus casei LC2W

HUANG Qian1，DU Zhao-ping2，MA Cheng-jie2，PAN Neng-qing1，LIU Lei1，MA Ai-min1,*

1. College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China； 2. State Key Laboratory of Dairy Biotechnology, Technical Center of Bright Dairy & Food Co. Ltd., Shanghai 200436, China

Received:2011-12-18 Revised:2013-01-17 Online:2013-03-15 Published:2013-04-16
Contact: Ma Ai-Min E-mail:maaimin@yahoo.com

摘要/Abstract

摘要： 以干酪乳杆菌LC2W为出发菌株，对其进行原生质体制备与再生。通过单因素试验研究菌龄、溶菌酶质量浓度、酶解时间及酶解温度对干酪乳杆菌LC2W原生质体制备的影响，并对制备条件进行正交设计优化。结果表明：干酪乳杆菌LC2W原生质体制备的最佳条件为：菌龄8h、酶质量浓度10mg/mL、酶解时间75min、酶解温度42℃，在此条件下制备原生质体并进行再生实验，原生质体形成率达到97.15%，再生率可达到31.25%。研究结果可为L. casei LC2W食品级外源表达系统的构建提供初步的基础。

关键词: 干酪乳杆菌, 原生质体, 制备, 再生

Abstract: The protoplast of Lactobacillus casei LC2W was prepared and regenerated in this study. The effects of cell age, lysozyme concentration, enzymolysis time and enzymolysis temperature on protoplast preparation were investigated according to the single factor tests. The conditions for protoplast preparation of L. casei LC2W were optimized by orthogonal tests. The results revealed that the optimal parameters for protoplast preparation of L. casei LC2W were cell age of 8 h, lysozyme concentration of 10 mg/mL, enzymolysis time of 75 min and enzymolysis temperature of 42 ℃. Under these optimal conditions, the protoplast formation rate reached up to 97.15% and the regeneration rate of L. casei LC2W was 31.25%.

Key words: Lactobacillus casei, protoplast, preparation, regeneration

中图分类号:

Q932

黄茜1，杜昭平2，马成杰2，潘能庆1，刘蕾1，马爱民1,*. 干酪乳杆菌LC2W原生质体的制备与再生[J]. 食品科学, 2013, 34(5): 167-171.

HUANG Qian1，DU Zhao-ping2，MA Cheng-jie2，PAN Neng-qing1，LIU Lei1，MA Ai-min1,*. Protoplast Preparation and Regeneration of Lactobacillus casei LC2W[J]. FOOD SCIENCE, 2013, 34(5): 167-171.

参考文献

[1]谭周进, 杨海君, 林曙, 等. 利用原生质体融合技术选育微生物菌种[J]. 核农学报, 2005, 19(1): 75-79.
[2]阮孟斌, 朱明月, 周鹏. 外源基因在乳酸菌中的表达[J]. 应用与环境生物学报, 2004, 10(4): 526-529.
[3]韩璞, 田洪涛, 苑社强, 等. 罗伊氏乳杆菌原生质体的制备与再生条件的研究[J]. 中国食品学报, 2010, 10(1): 10-18.
[4]张莉滟, 陈林, 张德纯. 保加利亚乳杆菌原生质体的制备与回复研究[J]. 中国微生态学杂志, 2004, 16(2): 73-74.
[5]王玉华, 张桂荣, 刘景圣. 原生质体融合提高嗜酸乳杆菌耐酸及耐胆盐能力[J]. 食品科学, 2006, 27(3): 96-99.
[6]贾建波, 陈军, 时号. 乳酸菌融合菌株的构建及其特性研究[J]. 食品科学, 2009, 30(21): 309-311.
[7]罗红霞, 陈志刚, 黄彦芳, 等. 原生质体融合技术选育弱后酸化乳酸菌菌株的研究[J]. 中国乳品工业, 2010, 38(1): 8-11.
[8]董成, 张和平, 赵树平, 等. 利用Lactobacillus casei Zhang开发益生菌新鲜干酪[J]. 食品与发酵工业, 2008, 34(6): 140-145.
[9]魏春华, 刘建奎, 侯喜林, 等. 重组ETEC k88ac-LTB干酪乳杆菌在人工消化液中的生存性能[J]. 生物工程学报, 2009, 25(1): 43-48.
[10]XU Y, LI Y. Construction of recombinant Lactobacillus casei efficiently surface displayed and secreted porcine parvovirus VP2 protein and comparison of the immune responses induced by oral immunization[J]. Immunology, 2008, 124(1): 68-75.
[11]CHEN H, LAI Y, CHEN C. Probiotic Lactobacillus casei expressing human lactoferrin elevates antibacterial activity in the gastrointestinal tract[J]. Biometals, 2010, 23(3): 543-554.
[12]辛羚, 郭本恒, 吴正钧. 3株乳杆菌在模拟消化环境中存活性能的研究[J]. 中国乳品工业, 2005, 33(5): 15-17.
[13]吴正钧. 干酪乳杆菌LC2W菌体的抗高血压作用[J]. 天然产物研究与开发, 2011, 23(2): 228-231.
[14]凌代文. 乳酸细菌分类鉴定及实验方法[M]. 北京: 中国轻工业出版社, 1999: 85-120.
[15]PATNAIK R, LOUIE S, GAVRILOVIC V, et al. Genome shuffling of Lactobacillus for improved acid tolerance[J]. Nature Biotechnology, 2002, 20(7): 707-712.
[16]曾献春, 孟冬丽. 乳酸菌原生质体制备与再生研究[J]. 食品科学, 2006, 27(10): 269-272.
[17]罗立新. 细胞融合技术与应用[M]. 北京: 化学工业出版社, 2004, 81-83.
[18]孙磊, 孔文涛, 孔健. 乳酸乳球菌电转化条件的研究[J]. 山东大学学报, 2005, 40(3): 123.
[19]仝千秋. 保加利亚乳杆菌生物学特性及原生质体制备的研究[D]. 郑州: 河南农业大学, 2006.
[20]邱静, 罗水忠, 姜绍通, 等. 高产L-乳酸米根霉的原生质体制备与再生条件研究[J]. 食品科学, 2011, 32 (9): 174-178.
[21]仲松, 张庆庆, 孙平平. 紫外诱变原生质体选育高产L-乳酸菌株的研究[J]. 安徽工程大学学报, 2011, 26(1): 28-30.
[22]李秀珍, 杨平平, 王燕. 黑曲霉原生质体诱变育种技术研究进展[J]. 中国酿造, 2007, 12: 1-5.
[23]艾连中, 郭本恒, 张灏, 等. 干酪乳杆菌LC2W合成胞外多糖培养基成分的优化[J]. 中国乳品工业, 2007, 35(2): 16-19.
[24]谷伟, 钱方. 乳酸菌的生物工程育种[J]. 食品科技, 2007, 32(1): 4-7.

干酪乳杆菌LC2W原生质体的制备与再生

Protoplast Preparation and Regeneration of Lactobacillus casei LC2W

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[1]	陈雪华，徐欣东，王清，齐鹏翔，陈山. 木薯淀粉基膜材料的研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(9): 254-263.
[2]	胡晓，周雅，陈星星，李来好，杨贤庆，陈胜军，吴燕燕，杨少玲. 罗非鱼肌浆蛋白源抗氧化肽的制备、分离纯化及其体外抗氧化活性[J]. 食品科学, 2021, 42(3): 63-70.
[3]	刘慧，吴颖，黄华. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其衍生物检测方法的研究进展[J]. 食品科学, 2021, 42(15): 356-365.
[4]	陈卫军，刘东红，李云成，孟凡冰，刘达玉. 制备方法对乳清分离蛋白-绿原酸共价接枝物结构和功能性质的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(13): 43-50.
[5]	章智华，钟舒睿，彭飞，曾英杰，宗敏华，娄文勇. 微胶囊壁材及制备技术的研究进展[J]. 食品科学, 2020, 41(9): 246-253.
[6]	孙翠霞，宋镜如，方亚鹏. 玉米醇溶蛋白-多糖纳米复合物的制备方法、结构表征及其功能特性研究进展[J]. 食品科学, 2020, 41(9): 323-331.
[7]	郭金凤，杨婕，李宝坤，金丹，黎旭，卢士玲，王庆玲，姬华，董娟，李应彪，蒋彩虹. 副干酪乳杆菌SMN-LBK在乙醇胁迫下的转录组分析[J]. 食品科学, 2020, 41(6): 116-122.
[8]	郭浩男，张莉力，冯琳琳，王天琪，王成，赵昕琪，许云贺. 结合淀粉活性乳酸菌利用生淀粉产酶条件及代谢产物[J]. 食品科学, 2020, 41(24): 46-53.
[9]	唐君钰，周建伟，高德，程焕，徐恩波，刘东红. 多物理场促进抗性淀粉生成的研究进展[J]. 食品科学, 2020, 41(23): 283-292.
[10]	赵小云, 黄琪琳, 张宾佳, 曾令军, 张甲奇, 文兴. 淀粉-脂质/脂肪酸复合物研究进展[J]. 食品科学, 2020, 41(15): 338-347.
[11]	张锦华，郭楠，杨妍，李庆鹏，郭芹，段玉权，哈益明. 西兰花副产物中萝卜硫素提取、纯化及鉴定[J]. 食品科学, 2019, 40(8): 248-255.
[12]	赵尹毓，田筱娜，周光宏，张万刚. 再生纤维素凝胶对乳清分离蛋白预乳化液稳定性的影响[J]. 食品科学, 2019, 40(6): 16-21.
[13]	任琦琦，任皓威，杨翠翠，刘宁. 干酪乳杆菌胞外多糖诱导小鼠骨髓来源树突细胞成熟以及分泌IL-6、TGF-β和IL-23[J]. 食品科学, 2019, 40(5): 175-182.
[14]	张哲奇，臧明伍，张凯华，李丹，王守伟，李笑曼，薛丹丹. 关键工艺对粉蒸肉挥发性特征风味形成的影响[J]. 食品科学, 2019, 40(4): 222-228.
[15]	崔梦楠，鹿瑶，高彦祥，毛立科. 食品乳液凝胶的制备及其应用研究进展[J]. 食品科学, 2019, 40(3): 323-329.