1 株产酸性α-淀粉酶黑曲霉原生质体制备和再生条件优化

doi:10.7506/spkx1002-6630-201401030

食品科学 ›› 2014, Vol. 35 ›› Issue (1): 155-158.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201401030

1 株产酸性α-淀粉酶黑曲霉原生质体制备和再生条件优化

王发祥，俞健，王建辉，李向红，何纪华，刘永乐*

WANG Fa-xiang, YU Jian, WANG Jian-hui, LI Xiang-hong, HE Ji-hua, LIU Yong-le*

收稿日期:2012-12-25 修回日期:2013-11-20 出版日期:2014-01-15 发布日期:2014-01-22
通讯作者: 刘永乐 E-mail:wfaxiang@163.com
基金资助:
“十二五”国家科技支撑计划项目（2012BAD31B08）；国家自然科学基金项目（31201427；31101214）；
湖南省自然科学基金项目（12JJ6028）；湖南省科技计划项目（2012NK3061）；长沙市科技局重点项目（K1201140-21）

Optimization of Protoplast Formation and Regeneration from an Aspergilli niger Strain Producing Acid-Stable α-Amylase

WANG Fa-xiang, YU Jian, WANG Jian-hui, LI Xiang-hong, HE Ji-hua, LIU Yong-le*

College of Chemistry and Biological Engineering, Changsha University of Science and Technology, Changsha 410114, China

Received:2012-12-25 Revised:2013-11-20 Online:2014-01-15 Published:2014-01-22
Contact: LIU Yong-le E-mail:wfaxiang@163.com

摘要/Abstract

摘要：

通过单因素试验、Plackett-Burman（PB）试验和响应面优化获得产酸性α-淀粉酶黑曲霉孢子原生质体制备和再生的最佳工艺参数：黑曲霉种龄72 h、孢子浓度7.5×106CFU/mL、渗透压稳定剂甘露醇浓度0.85 mol/L，以10 g/L蜗牛酶＋ 10 g/L 纤维素酶＋ 10 g/L 溶菌酶为破壁酶、pH 6.8、酶解温度37 ℃、酶解2 h。在此条件下，原生质体制备率可达86.92%，再生率可达42.67%。

关键词: 原生质体；酸性&alpha, -淀粉酶；黑曲霉；响应面法；制备；再生

Abstract:

The formation and regeneration of the protoplast from Asperigillus niger with high yield of acid-stable α-amylase was Optimized using single factor experiments, Plackett-Burman design and response surface method. The optimum conditions for protoplast formation and regeneration were as follows: A. niger aged at 72h, spore concentration at 7.5×106 CFU/mL, hydrolysis with 10 g/L snailase, 10 g/L cellulose and 10 g/L lysozyme under 37℃, pH 6.8 for 2 h, and 0.85 mol/L mannitol for stabilization of osmotic pressure. At this condition, the rate of protoplast formation and regeneration reached 86.92% and 42.67 %, rescpectively.

Key words: protoplast, acid-stable α-amylase, Aspergilli niger, response surface methodology, formation, regeneration

中图分类号:

Q93.3

王发祥，俞健，王建辉，李向红，何纪华，刘永乐*. 1 株产酸性α-淀粉酶黑曲霉原生质体制备和再生条件优化[J]. 食品科学, 2014, 35(1): 155-158.

WANG Fa-xiang, YU Jian, WANG Jian-hui, LI Xiang-hong, HE Ji-hua, LIU Yong-le*. Optimization of Protoplast Formation and Regeneration from an Aspergilli niger Strain Producing Acid-Stable α-Amylase[J]. FOOD SCIENCE, 2014, 35(1): 155-158.

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