食品科学 ›› 2022, Vol. 43 ›› Issue (6): 158-164.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20210201-014
孙乐常,文嘉欣,杜瀚,林怡晨,刘光明,曹敏杰
SUN Lechang, WEN Jiaxin, DU Han, LIN Yichen, LIU Guangming, CAO Minjie
摘要: 以蓝圆鲹肝脏为对象,通过硫酸铵盐析、Q-Sepharose阴离子交换柱层析、Q-HP阴离子交换柱层析、Phenyl Fast Flow疏水柱层析和Superdex G75凝胶过滤柱层析技术分离纯化得到一种酯酶。该酶的回收率为0.69%,纯化倍数为1 150 倍。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳与Superdex G75凝胶过滤柱层析结果显示纯化得到的酯酶分子质量为61.18?kDa。肽指纹图谱显示其肽段与红鳍东方鲀假定脂酰辅酶A水解酶一致。该酶的最适条件为pH?8.0、50?℃;在pH?6.0~10.0、温度4~40?℃条件下稳定性较高;金属离子K+、Zn2+、Cu2+、Al3+和Fe2+会使酯酶活性显著下降,而Ba2+、Ca2+、Mn2+、Co2+和Mg2+则会促进酶活性;该酶对甲醇、乙醇、丙酮和异丙醇等有机溶剂与盐具有较强的耐受性。底物特异性表明该酶在水溶液中偏向于水解中短链酯,对长链酯无水解活性,而在乳化体系中对长链酯也有较高的水解活性,显示出其具有酯酶与脂肪酶的双重活性。
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