野油菜黄单胞菌产胶基因GumD克隆与重组质粒的构建

食品科学 ›› 2006, Vol. 27 ›› Issue (11): 182-184.

野油菜黄单胞菌产胶基因GumD克隆与重组质粒的构建

欧杰, 李柏林, 刘莹, 徐明全

上海水产大学食品学院；深圳市农业科学研究中心基因工程实验室

出版日期:2006-11-15 发布日期:2011-11-28

Cloning of Producing Colloid Gene GumD from Xanthomonas campestris and Constructing of Recombinant Plasmid

欧Jie , Li-Bai-Lin, Liu-Ying, Xu-Ming-Quan

1.College of Food Science,Shanghai Fisheries University,Shanghai 200090,China; 2.Lab of Genetic Engineering,Shenzhen Research Center of Agricultural Sciences,Shenzhen 518040,China

Online:2006-11-15 Published:2011-11-28

摘要/Abstract

摘要： 目的:建立野油菜黄单胞菌产胶基因GumD的克隆与重组质粒构建的方法。方法:以优化PCR实验条件扩增得到野油菜黄单胞菌产胶基因GumD片断,与抗药性质粒pMD18-T连接,获得重组质粒,并用CaCl2法转化JM109大肠杆菌细胞。结果:DNA测序结果表明,成功克隆产胶基因和构建重组质粒。结论:此方法可用于克隆野油菜黄单胞菌产胶基因和构建产胶基因重组质粒。

关键词: , 野油菜黄单胞菌, 产胶基因, 克隆, 重组质粒

Abstract: Objective: To establish the methods of cloning gene GumD from Xanthomonas campestris and constructing recombinant plasmid. MethodThe fragment of the producing colloid gene GumD from Xanthomonas campestris was amplified by the optimized experiment of PCR method,then the gene GumD and plasmid pMD18- T with drug-resistant qualities was connected. In order to clone and rebuild the recombinant plasmid,E. coli JM109 was transformed with the recombinant plasmid by way of CaCl2. ResultCompared with the sequence from the gene bank,the correct sequence of recombinant plasmid was confirmed by DNA sequencing. Conclusion: This approach could be used to clone producing colloid gene GumD and construct recombinant plasmid.

Key words: , Xanthomonas campestris； producing colloid gene； cloning； recombinant plasmid；

欧杰, 李柏林, 刘莹, 徐明全. 野油菜黄单胞菌产胶基因GumD克隆与重组质粒的构建[J]. 食品科学, 2006, 27(11): 182-184.

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