食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (13): 180-183.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201013041
翟一凡1,向军俭1 ,* ,唐 勇1,郭常伟1,刘小锋2,杨红宇1
ZHAI Yi-fan1,XIANG Jun-jian1,*,TANG Yong1,GUO Chang-wei1,LIU Xiao-feng2,YANG Hong-yu1
摘要:
目的:合成铅离子完全抗原,并对其进行鉴定;用合成的完全抗原免疫Balb/c 小鼠制备多克隆抗体,鉴定效价和特异性。方法:用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA 将Pb2+ 与载体蛋白BSA 和OVA 偶联在一起,合成免疫抗原(Pb-DTPA-BSA)和检测抗原(Pb-DTPA-OVA),并通过SDS-PAGE、紫外扫描、电感耦合等离子体(ICP) 检测抗原中Pb2+ 含量,以及通过免疫Balb/c 小鼠,采集血清进行间接ELISA 和竞争ELISA 检测。结果:两种合成的抗原相对于各自的载体蛋白均出现了蛋白条带滞后,紫外吸收峰偏移等现象;免疫的4 号和5 号Balb/c 小鼠的抗血清效价达1:400000;与OVA 无交叉反应,ELISA 检测IC50 值为1.5ng/mL,与Fe3+ 有近5% 的交叉反应,与其他重金属离子的交叉反应均小于1%。结论:铅离子多克隆抗体制备成功。
中图分类号: