食品科学 ›› 2011, Vol. 32 ›› Issue (12): 278-282.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201112061
胡 慧,陈雅君,段志刚,孟振北,彭新然,张龙现,崔保安,王亚宾
HU Hui1,CHEN Ya-jun1,DUAN Zhi-gang1,MENG Zhen-bei2,PENG Xin-ran2,ZHANG Long-xian1, CUI Bao-an1,WANG Ya-bin1,*
摘要: 为建立快速、特异的检测大肠杆菌O157:H7的实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,针对大肠杆菌O157:H7的特异基因rfbE设计一对特异引物,建立SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法,并进行灵敏度、重复性和特异性实验,同时与常规PCR方法进行比较。结果显示所建立的SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法可以快速、特异地检测出大肠杆菌O157:H7,细菌纯培养物中其灵敏度可达2×101CFU/mL,临床模拟污染肉样中能最低能检测到1×102CFU/mL的大肠杆菌O157:H7。与常规PCR方法相比,SYBR GreenⅠ实时定量 PCR方法对临床样品中大肠杆菌O157:H7的检出率大大提高。本研究建立的SYBR GreenⅠ荧光定量 PCR技术能快速准确、特异、敏感地检测大肠杆菌O157:H7。
中图分类号: