食品科学 ›› 2021, Vol. 42 ›› Issue (17): 186-192.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20200828-382
李西栋,孙绍霞,梁亚楠,石塔拉,宓伟
LI Xidong, SUN Shaoxia, LIANG Yanan, SHI Tala, MI Wei
摘要: 目的:探讨山楂原花青素(hawthorn proanthocyanidin,HPC)和VC联合通过Wnt/β-catenin通路减轻胰岛素抵抗大鼠氧化应激的机制。方法:80 只雄性Wistar大鼠通过高脂膳食法建立胰岛素抵抗模型,10 只饲喂普通饲料作为对照组,检测大鼠造模前后体质量变化和造模后空腹血糖、血清胰岛素浓度,比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活力;随机选取50 只造模成功的胰岛素抵抗大鼠分为模型组、HPC组(56 μg/mL)、VC组(180 μg/mL)、HPC(56 μg/mL)+VC(180 μg/mL)组和二甲双胍(2 μg/mL)组,每组各10 只。连续给药12 周,测定各组大鼠血液中葡萄糖、胰岛素浓度以及肝匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平;实时定量聚合酶链式反应检测Wnt1、轴蛋白(Axin)、糖原合酶激酶-3β(glycogen synthasc kinase-3β,GSK-3β)、腺瘤样息肉病蛋白(adenomatous polyposis coli protein,APC)、β-catenin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors γ,PPARγ)的mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测肝组织Wnt1、β-catenin和PPARγ的蛋白表达水平;荧光共振能量转移分析法检测Wnt1和Dsh蛋白结合的情况。结果:80 只大鼠给予高脂膳食喂养,有54 只造模成功,成功率67.5%。造模后,模型组大鼠的体质量以及空腹血糖、血清胰岛素、ALT、AST和ALP水平均极显著高于对照组大鼠(P<0.01)。与模型组相比,HPC组、HPC+VC组和二甲双胍组大鼠肝匀浆中各指标水平均有极显著差异(P<0.01),HPC+VC组对肝匀浆中各指标干预效果显著优于HPC组(P<0.05);HPC+VC组Wnt1和β-catenin的mRNA相对表达水平极显著降低(P<0.01),Axin、GSK-3β、APC和PPARγ的mRNA相对表达水平极显著升高(P<0.01);HPC+VC组Wnt1和β-catenin的蛋白相对表达水平极显著降低(P<0.01),PPARγ的蛋白表达水平极显著升高(P<0.01);HPC+VC组的荧光共振能量转移信号明显减弱,说明随着时间的延长,Wnt1与Dsh之间的结合力明显减弱,形成的异源二聚体数量明显减少。结论:HPC和VC联合可通过Wnt/β-catenin通路改善胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激状况。
中图分类号: