韦伯灵芝漆酶的分离纯化及其性质

doi:10.7506/spkx1002-6300-201005045

食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (5): 201-205.doi: 10.7506/spkx1002-6300-201005045

韦伯灵芝漆酶的分离纯化及其性质

陈琼华¹，周玉萍²，陈晓¹，柯德森¹，程惠贞²，田长恩^{1 , 2 ,*}

1.广州大学生命科学学院 2.广州大学植物抗逆基因功能研究广州市重点实验室

收稿日期:2009-07-25 修回日期:2009-11-11 出版日期:2010-03-01 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 田长恩 E-mail:changentian@yahoo.com.cn
基金资助:
广东省自然科学基金项目(8151009101000013)；广东省科技计划项目(2007B080701008)；
广州市高校科学技术研究项目(62031)；广州大学植物抗逆基因功能研究广州市重点实验室开放基金项目(200801)

Purification and Characterization of Laccase from Ganoderma weberianum

CHEN Qiong-hua1，ZHOU Yu-ping2，CHEN Xiao1，KE De-sen1，CHENG Hui-zhen2，TIAN Chang-en1,2,*

1. School of Life Sciences, Guangzhou University, Guangzhou 510006, China；2. Guangzhou Key Laboratory for Functional
Studies on Plant Stress-Resistant Genes, Guangzhou University, Guangzhou 510006, China

Received:2009-07-25 Revised:2009-11-11 Online:2010-03-01 Published:2010-12-29
Contact: TIAN Chang-en1 E-mail:changentian@yahoo.com.cn

摘要/Abstract

摘要：

采用硫酸铵分级盐析、透析、聚乙二醇浓缩和高效液相色谱柱层析从韦伯灵芝TZC-1 发酵液中分离纯化得到电泳纯漆酶，其纯化倍数为37.1 倍，酶活性回收率为21.3%。活性-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)结果表明该漆酶由一种同工酶组成，纯化漆酶经SDS-PAGE 检测显示为单一条带，其分子质量约为40kD。该漆酶催化底物ABTS 的最适反应温度为50～60℃，最适反应pH 值为4.6，在60℃以下和pH3.0～5.0 范围内保持稳定，以ABTS为底物的表观Km 值为13.8μmol/L。Fe2+ 完全抑制酶活，Al3+ 和Mn2+ 对该漆酶也有明显抑制作用，Hg+、Cu2+ 和Mg2+ 对该酶有明显激活作用，而Zn2+、Ba2+ 及K+ 对该酶活性影响不大。

关键词: 韦伯灵芝, 漆酶, 纯化, 酶活

Abstract:

The laccase from Ganoderma weberianum TZC-1 was purified using fractional ammonium sulfate precipitation, dialysis, polyethylene glycol condensation and high performance liquid column chromatography. Compared to the crude extract, its purity exhibited a 37.1-fold improvement and the recovery rate of enzyme activity was 21.3%. Meanwhile, SDS-PAGE analysis revealed a single band with molecular weight of 40 kD. Moreover, the optimal reaction conditions of this laccase towards ABTS as substrate included 50－60 ℃ of reaction temperature and pH 4.6. The Km value was 13.8 μmol/L under these optimal reaction conditions. Furthermore, the activity of the enzyme exhibited excellent stability below 60 ℃ and pH 3.0－ 5.5, but could be inhibited by Fe2+, Al3+ and Mn2+ and enhanced by Hg+, Cu2+ and Mg2+. No obvious effect on laccase activity was observed due to Zn2+, Ba2+ and K+.

Key words: Ganoderma weberianum, laccase, purification, enzyme activity

中图分类号:

Q554

陈琼华1，周玉萍2，陈晓1，柯德森1，程惠贞2，田长恩1,2,*. 韦伯灵芝漆酶的分离纯化及其性质[J]. 食品科学, 2010, 31(5): 201-205.

CHEN Qiong-hua1，ZHOU Yu-ping2，CHEN Xiao1，KE De-sen1，CHENG Hui-zhen2，TIAN Chang-en1,2,*. Purification and Characterization of Laccase from Ganoderma weberianum[J]. FOOD SCIENCE, 2010, 31(5): 201-205.

[1]	王大将，张梦宇，岳正洋，周会玲. 绿原酸对苹果采后灰霉病抗性的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(9): 177-183.
[2]	项婷，夏琛，刘健华，王超然，沈建福. 蛹虫草中新化合物的分离纯化、结构鉴定及抗肿瘤活性[J]. 食品科学, 2021, 42(8): 235-242.
[3]	王伟，李津津，迟海. 解淀粉芽孢杆菌素Amylocyclicin W5的纯化及其抑菌机理[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 29-34.
[4]	侯艳茹，苏琳，侯普馨，白艳苹，孙冰，赵丽华，黄凯飚，吕科，靳烨. 饲养方式对苏尼特羊肌纤维组成和肉品质的影响及其调控机理[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 83-89.
[5]	苏琳，李慧姣，侯艳茹，赵雅娟，白艳苹，孙冰，赵丽华，靳烨. 一水肌酸及共轭亚油酸对大鼠肌纤维相关基因和酶活性的影响及机理[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 149-155.
[6]	吴博华，蒋雪薇，张金玉，阮志强，梁胜男，陈永发，周尚庭. 促酱醪发酵芽孢杆菌的筛选及应用[J]. 食品科学, 2021, 42(6): 134-141.
[7]	周雅琪，黄佳茵，陈美玉，葛雨珺，李苑，胡亚芹. 亚牛磺酸对南美白对虾多酚氧化酶活性及酶构象的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 100-106.
[8]	魏晨业，包晓玮，王娟，何梦梦，曾兰君，张亚涛. 沙棘多糖分离纯化及抗氧化活性[J]. 食品科学, 2021, 42(4): 227-232.
[9]	胡晓，周雅，陈星星，李来好，杨贤庆，陈胜军，吴燕燕，杨少玲. 罗非鱼肌浆蛋白源抗氧化肽的制备、分离纯化及其体外抗氧化活性[J]. 食品科学, 2021, 42(3): 63-70.
[10]	高兆建，王秋芬，丁飞鸿，许祥，赵宜峰，焦魏，陈腾. 广谱拮抗菌株的筛选诱变及抗菌物质分离鉴定[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 143-150.
[11]	杨其乐，丁一峰，张宇，聂若男，李亚萌，王佳，王小红. 沙门氏菌噬菌体LPST144尾纤维gp38的序列分析及其结合活性[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 66-73.
[12]	李钰景，孙丽平，庄永亮. 红毛丹果皮中老鹳草素的分离纯化及其热稳定性[J]. 食品科学, 2021, 42(15): 44-49.
[13]	王瑾，白羽嘉，冯作山，朱婉彤，曾禹睿慷，蒋莉莹. 链格孢侵染采后甜瓜病程相关蛋白基因表达及酶活性变化规律[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 94-102.
[14]	高兆建，丁飞鸿，陈欢，耿云龙，赵宜峰. 产黄青霉抗真菌几丁质酶的纯化及特性分析[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 129-136.
[15]	杨汝晴，陈守峰，肖琳琳，陈玉磊，孙乐常，张凌晶，刘光明，曹敏杰. 鲈鱼脯氨酰内肽酶的分离纯化、性质分析及分子克隆[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 78-85.

韦伯灵芝漆酶的分离纯化及其性质

Purification and Characterization of Laccase from Ganoderma weberianum

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价