食品科学 ›› 2007, Vol. 28 ›› Issue (7): 276-279.
汪靖超, 孙东平, 杜桂彩, 郭道森, 李荣贵
WANG Jing-Chao, SUN Dong-Ping, DU Gui-Cai, GUO Dao-Sen, LI Rong-Gui
摘要: 噬夏孢欧文氏菌基因crtE编码GGPP合成酶。通过PCR扩增获得crtE基因,克隆进表达载体,构建表达质粒pET-15bcrtE。重组质粒转化E.coli BL21(DE3),构建工程菌;重组GGPP合成酶在大肠杆菌中实现了高效表达,表达量占菌体总蛋白的42%。重组蛋白以包含体形式存在,包含体经洗涤、尿素溶解、复性并经镍离子亲和层析树脂纯化,得到了电泳纯的重组噬夏孢欧文氏菌GGPP合成酶,带有His-tag的该蛋白分子量为34kDa,pI值为6.3。