食品科学 ›› 2018, Vol. 39 ›› Issue (16): 336-342.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201816049
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刘?姚,韦倩妮,王?弘,杨金易,孙远明,徐振林,沈?兴,李向梅,雷红涛*
LIU Yao, WEI Qianni, WANG Hong, YANG Jinyi, SUN Yuanming, XU Zhenlin, SHEN Xing, LI Xiangmei, LEI Hongtao*
摘要: 建立蜂蜜中氯霉素直接竞争酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。以抗氯霉素单克隆抗体为包被原,氯霉素-辣根过氧化物偶联物为标记物,3,3’,5,5’-四甲基联苯胺作显色底物,对其主要影响因素,如标准品稀释液、包被温度、包被抗体稀释倍数等6?个因素进行优化,同时还对该方法的准确性和稳定性进行考察。结果表明:所建立的直接竞争ELISA标准曲线方程式为y=-17.425x+97.509,相关系数R2为0.991?2,IC50值为0.63?ng/mL,检出限和线性检测范围分别为(0.04±0.01)ng/mL和0.10~4.17?ng/mL;另外整个检测反应过程耗时约为40?min。蜂蜜样品的检出限和定量限分别为0.15?ng/g和0.33?ng/g,添加回收率在97.58%~100.94%之间,批内变异系数和批间变异系数均小于11%,表明该方法具有高精确度和稳定性。
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