食品科学 ›› 2021, Vol. 42 ›› Issue (16): 286-292.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20200210-079
王丹丹,李莉,杨艳歌,刘鸣畅,王洪越,吴淑清,袁飞,吴亚君
WANG Dandan, LI Li, YANG Yange, LIU Mingchang, WANG Hongyue, WU Shuqing, YUAN Fei, WU Yajun
摘要: 以克罗诺杆菌属具有代表性的2?株模式菌株(丙二酸盐阳性克罗诺杆菌和阪崎肠杆菌)为实验对象,建立了一套集一步法DNA提取和快速实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)法检测为一体的速测技术体系。通过优化,建立的快速real-time PCR程序可将扩增时间由普通程序的82?min缩短至27?min?18?s。建立的一步快速DNA提取流程,取样后仅需12?min热循环反应即可直接获取DNA,简便快捷。与传统方法的对比结果显示,快提法与传统煮沸法对纯菌液和人工污染培养前6?h的样品灵敏度一致;对人工污染样品培养7、8?h时,快检法的灵敏度比传统方法低1 个数量级。本研究建立的微生物速测技术快速、简便且具有较高灵敏度,在口岸食源性病源微生物现场快速检测方面具有较好的应用前景。
中图分类号: