食品科学 ›› 2021, Vol. 42 ›› Issue (24): 289-295.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20200927-329
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董晶,徐慧,郭威,卢鑫,张伟
发布日期:
2021-12-30
基金资助:
DONG Jing, XU Hui, GUO Wei, LU Xin, ZHANG Wei
Published:
2021-12-30
摘要: 目的:为快速检测虾产品中的活副溶血性弧菌,建立一种实时荧光跨越式滚环等温扩增(real-time fluorescent saltatory rolling circle amplification,RF-SRCA)与叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)染料相结合的检测方法。方法:依据副溶血性弧菌的特异性基因toxR设计并筛选引物,对PMA-RF-SRCA检测方法进行特异性、灵敏度及检出限分析,并与PMA-实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法进行对比。对76 份样品进行检测,以GB 4789.7—2013方法为标准,对PMA-RF-SRCA方法的相对敏感性、相对特异性、相对符合率进行计算,以对本方法的实用性进行评估。结果:此方法的引物特异性良好,12?株副溶血性弧菌结果均呈阳性,18?株非副溶血性弧菌结果均呈阴性;PMA-RF-SRCA法灵敏度为3.2×100?CFU/mL,检出限为2.08×101?CFU/g,此方法的灵敏度是PMA-real-time PCR的100?倍。经过实际样品检测,PMA-RF-SRCA方法的敏感性、特异性、符合率分别为100.00%、96.00%和98.68%。结论:PMA-RF-SRCA方法特异性强、灵敏度高,可用于虾产品中的活副溶血性弧菌的检测与筛查。
中图分类号:
董晶,徐慧,郭威,卢鑫,张伟,. 实时荧光跨越式滚环等温扩增结合PMA检测虾产品中的活副溶血性弧菌[J]. 食品科学, 2021, 42(24): 289-295.
DONG Jing, XU Hui, GUO Wei, LU Xin, ZHANG Wei. Detection of Vibrio parahaemolyticus in Edible Crustaceans by Real-time Fluorescence Saltatory Rolling Circle Amplification Combined with Propidium Monoazide[J]. FOOD SCIENCE, 2021, 42(24): 289-295.
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