黄粉虫蛋白抗菌肽酶解工艺研究

doi:10.7506/spkx1002-6630-200915035

食品科学 ›› 2009, Vol. 30 ›› Issue (15 ): 156-159.doi: 10.7506/spkx1002-6630-200915035

黄粉虫蛋白抗菌肽酶解工艺研究

刘汉灵^{1 , 2}，潘扬昌^{1 ,*} ，王孝英¹，胡李凤²

1. 广西大学化学化工学院 2. 南宁庞博生物工程有限公司

收稿日期:2009-05-26 出版日期:2009-08-01 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 潘扬昌1 ,* E-mail:nnpyc0808@126.com

Response Surface Methodology as An Approach to Optimize Enzymatic Preparation of Antibacterial Peptides from Tenebrio molitor Protein

LIU Han-ling1,2，PAN Yang-chang1,*，WANG Xiao-ying1，HU Li-feng2

(1. School of Chemistry and Chemical Engineering, Guangxi University, Nanning 530004, China；
2. Nanning Pangbo Biological Engineering Co. Ltd., Nanning 530004, China)

Received:2009-05-26 Online:2009-08-01 Published:2010-12-29
Contact: PAN Yang-chang1,*， E-mail:nnpyc0808@126.com

摘要/Abstract

摘要：

对8 种常用蛋白酶进行筛选，确定最佳用酶，并对酶解产物进行SDS-PAGE 表征。再采用响应曲面试验方法(RSM)对胰蛋白酶水解工艺进行优化，利用Design-Expert7.1.6 软件进行统计分析，建立回归模型。结果表明，以胰蛋白酶为水解最佳用酶，抑菌圈直径为14.62mm；SDS-PAGE 表征可看出酶解物主要由小肽分子组成。胰蛋白酶水解最优工艺条件为：底物浓度([S])=11.84%，酶添加量([E])4.05‰，时间5.86h，pH8.5，温度40℃，在此条件下可获得抑菌圈直径达到16.54mm 的水解产物。验证实验显示，建立的回归模型准确可靠。

关键词: 抗菌肽, 黄粉虫, 酶解

Abstract:

Enzymolysis was applied to prepare antibacterial peptides from Tenebrio molitor protein. Tenebrio molitor protein was hydrolyzed with eight proteases respectively and among them trypsin was found to have the best comprehensive performance confirmed by the antibacterial activity and SDS pattern of corresponding hydrolysates as well as peptide concentration in their solution. The trypsin-catalyzed hydrolysis of Tenebrio molitor protein was optimized to attain the highest antibacterial activity using response surface design and a regression model for antibacterial activity as a function of substrate concentration, enzyme dose and hydrolysis duration were built up. Under optimized conditions: substrate concentration 11.84%, enzyme dose 4.05‰, pH 8.5 and temperature 40 ℃ for a hydrolysis duration of 5.86 h, the actual diameter of antibacterial circle of hydrolysates reached 16.54 mm, close to the predicted value of 16.98 mm.

Key words: antibacterial peptide, Tenebrio molitor, enzymolysis

中图分类号:

Q516

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