苏丹红Ⅰ单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA 检测

doi:10.7506/spkx1002-6630-201018060

食品科学 ›› 2010, Vol. 31 ›› Issue (18): 258-261.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201018060

苏丹红Ⅰ单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA 检测

裘雪梅，刘仁荣* ，徐玲，孟玮，涂顺，谢少霞

江西科技师范学院生命科学学院

收稿日期:2010-04-30 修回日期:2010-07-20 出版日期:2010-09-25 发布日期:2010-12-29
通讯作者: 刘仁荣 E-mail:lilirenrong@hotmail.com
基金资助:
江西省科技厅科技项目(GJJ10595)；江西科技师范学院博士科研启动基金项目

Monoclonal Antibodies against Sudan I: Preparation of and Application in Indirect Competitive ELISA Detection

QIU Xue-mei，LIU Ren-rong*，XU Ling，MENG Wei，TU Shun，XIE Shao-xia

College of Life Science, Jiangxi Science and Technology Normal University, Nanchang 330013, China

Received:2010-04-30 Revised:2010-07-20 Online:2010-09-25 Published:2010-12-29
Contact: LIU Ren-rong*， E-mail:lilirenrong@hotmail.com

摘要/Abstract

摘要：

重氮法合成苏丹红Ⅰ的结构类似物，通过活性酯法将苏丹红Ⅰ的结构类似物偶联到载体蛋白上制备人工抗原，用所制备的人工抗原免疫BALB/c 小鼠，采用细胞融合的方法制备苏丹红Ⅰ单克隆抗体，结果成功筛选到一株抗苏丹红Ⅰ单克隆抗体，经鉴定为IgG2a 型，并建立间接竞争ELISA 检测方法，线性范围为0.5～10ng/mL，检测下限为0.1ng/mL，加标回收率为52.3%～110%，变异系数为3.2%～8.9%。

关键词: 苏丹红Ⅰ, 单克隆抗体, ELISA检测

Abstract:

A SudanⅠanalog was synthesized by diazotization and conjugated to bovine serum albumin (BAS) or keyhole limpet hemocyanin (KLH) by active ester method and a BAS based detection antigen and a KLH based immune antigen were obtained. A competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was established to detect the immunogenity of the immune antigen. BALB/c mice were immunized with the immune antigen for antibody generation. For the preparation of anti-SudanⅠ monoclonal antibodies, cell fusion was used. An indirect competitive ELISA assay was developed. A linear relationship was observed over the concentration range of 0.5 to 10 ng/mL and the detection limit was 0.1 ng/mL. The average recovery rates of SudanⅠin red hot chili pepper powder spiked at 6 different levels were between 52.3% and 110% with variation coefficients varying from 3.2% to 8.9%.

Key words: Sudan Ⅰ, monoclonal antibody, ELISA detection

中图分类号:

裘雪梅，刘仁荣*,徐玲，孟玮，涂顺，谢少霞. 苏丹红Ⅰ单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA 检测[J]. 食品科学, 2010, 31(18): 258-261.

QIU Xue-mei，LIU Ren-rong*，XU Ling，MENG Wei，TU Shun，XIE Shao-xia. Monoclonal Antibodies against Sudan I: Preparation of and Application in Indirect Competitive ELISA Detection[J]. FOOD SCIENCE, 2010, 31(18): 258-261.

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苏丹红Ⅰ单克隆抗体的制备及其间接竞争ELISA 检测

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