植物乳杆菌melA基因的克隆及其作为食品级筛选标记的初步研究

doi:10.7506/spkx1002-6630-201109031

食品科学 ›› 2011, Vol. 32 ›› Issue (9): 135-139.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201109031

植物乳杆菌melA基因的克隆及其作为食品级筛选标记的初步研究

任大勇，李昌*，秦艳青，杜寿文，诸晴丽，金宁一

1.吉林农业大学食品科学与工程学院 2.中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所 3.吉林大学畜牧兽医学院

出版日期:2011-05-15 发布日期:2011-04-11
基金资助:
科技部重大传染病专项(2008ZX10004-015)；军内“十一五”科技攻关项目(06G127)；吉林省高新技术产业发展项目(2010)；长春市科技特派员行动计划项目(09KT04)

Cloning of melA Gene from L. plantarum as a Food Grade Selection Marker

REN Da-yong1,2,3，LI Chang2,*，QIN Yan-qing1,2，DU Shou-wen2,3，ZHU Qing-li2,3，JIN Ning-yi2,*

1. College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China； 2. Military Veterinary Institute, Academy of Military Medical Sciences of the PLA, Changchun 130062, China； 3. College of Animal and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China

Online:2011-05-15 Published:2011-04-11

摘要/Abstract

摘要： 以L. plantarum1.557的基因组DNA为模板，通过PCR技术成功克隆α-半乳糖苷酶基因(melA基因)，与报道的melA基因序列同源性达到99%以上。再以大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pMG36e为基本骨架，将melA基因插入该载体，构建melA基因标记的穿梭表达载体pMG36e-melA。重组表达质粒pMG36e-melA经Sac I和Sph I双酶切和PCR鉴定与预期片段大小相符。结果表明已初步构建了以melA基因为食品级筛选标记的重组载体。

关键词: α-半乳糖苷酶, melA, 食品级筛选标记, 穿梭表达载体, 乳酸乳球菌

Abstract: A full-length α-galactosidase gene (melA) sharing 99.2% identity with that previously reported melA (accession number: AF189765) was amplified by polymerase chain reaction (PCR) from L. plantarum 1.557 The PCR-amplified melA gene was cloned into the E. coli-L. plantarum shuttle vector pMG36e and transformed into E. coli DH5α. After the transformant was identified, the recombinant plasmid was purified and electrotransformed into L. lactis. The transformant containing melA gene was easy to detect by the observation of yellow colonies in BCP medium containing melibiose. This result indicated that α-galactosidase gene could be used as a maker for food grade selection.

Key words: α-galactosidase, melA gene, food grade selection marker, shuttle expression vector, Lactococcus lactis

中图分类号:

Q784

任大勇，李昌，秦艳青，杜寿文，诸晴丽，金宁一. 植物乳杆菌melA基因的克隆及其作为食品级筛选标记的初步研究[J]. 食品科学, 2011, 32(9): 135-139.

REN Da-yong，LI Chang，QIN Yan-qing，DU Shou-wen，ZHU Qing-li，JIN Ning-yi. Cloning of melA Gene from L. plantarum as a Food Grade Selection Marker[J]. FOOD SCIENCE, 2011, 32(9): 135-139.

[1]	武盟，曹伟超，程新，马子琳，罗昆，徐岩，黄卫宁，李宁，高铁成. 高产α-半乳糖苷酶乳酸菌发酵对鹰嘴豆酸面团生化特性及其面包烘焙品质的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(10): 146-153.
[2]	焦雯姝，关嘉琦，史佳鹭，李柏良，陆婧婧，闫芬芬，李娜，占萌，霍贵成. 响应面法优化乳酸乳球菌KLDS4.0325产叶酸的培养基成分及发酵条件[J]. 食品科学, 2020, 41(6): 123-130.
[3]	任大勇，朱剑威，刘宏妍，于寒松，沈明浩. PlnF抗菌肽在乳酸乳球菌中的分泌表达及抑菌活性鉴定[J]. 食品科学, 2019, 40(2): 146-151.
[4]	陈琪，张亚敏，赵颖，梅林，傅瑞燕. 表达外源谷氨酸脱羧酶基因对重组乳酸乳球菌胁迫抗性的影响[J]. 食品科学, 2018, 39(20): 132-139.
[5]	马霞，李路遥，何艳，程朝辉，于海燕. 发酵鲜湿米粉的优良菌种选育及品质研究[J]. 食品科学, 2017, 38(2): 98-103.
[6]	夏雪娟，郑炯，叶秀娟，吴金松，阚建全. 实时荧光定量PCR技术监测腌制麻竹笋中乳酸乳球菌动态变化[J]. 食品科学, 2016, 37(4): 88-92.
[7]	王翠艳，王玉华，朴春红，刘俊梅，胡耀辉，任大勇，于寒松. 绿色木霉纤维二糖水解酶基因的克隆及其在乳酸菌中的表达与鉴定[J]. 食品科学, 2016, 37(19): 141-146.
[8]	周颖，高晓峰，周晶，霍贵成*. 一株仅产L-乳酸的乳酸乳球菌发酵培养基的优化[J]. 食品科学, 2015, 36(9): 84-88.
[9]	陈佳，杨诗颖，柯崇榕，黄建忠*. 乳酸乳球菌生产γ-氨基丁酸条件的优化[J]. 食品科学, 2015, 36(7): 148-152.
[10]	连元元1，王颖2，李晨1，谷新晰1，盛耀2，黄昆仑2,，田洪涛1,. 镉胁迫下泡菜乳酸乳球菌的形态变化[J]. 食品科学, 2015, 36(1): 124-127.
[11]	马红丹1，张丽媛1，赵邯郸1，徐丹丹1，曲静2，关淑艳1,，王丕武2,. 大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达[J]. 食品科学, 2015, 36(1): 135-139.
[12]	周康，魏君，蒋翠莲，韩新锋，刘书亮. 乳酸乳球菌SQ117在不同温度和pH值条件下的生长动力学[J]. 食品科学, 2014, 35(7): 192-195.
[13]	杨晓春，王玉堂，霍贵成. 乳酸乳球菌KLDS4.0325的B族维生素生物合成途径分析[J]. 食品科学, 2014, 35(7): 86-89.
[14]	张艳丽，聂春明，周利伟，张伟，张宇宏，杨晓红. 牛凝乳酶原基因在食品级乳酸乳球菌中的重组表达[J]. 食品科学, 2014, 35(7): 123-127.
[15]	陈俊亮，张慧芸，田芬，霍贵成，康怀彬. 乳酸乳球菌乳脂亚种冷冻干燥保护剂优化及其贮藏稳定性[J]. 食品科学, 2014, 35(11): 109-114.

植物乳杆菌melA基因的克隆及其作为食品级筛选标记的初步研究

Cloning of melA Gene from L. plantarum as a Food Grade Selection Marker

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价