右旋糖苷对生姜蛋白酶的化学修饰及其酶学性质影响

doi:10.7506/spkx1002-6630-201309047

食品科学 ›› 2013, Vol. 34 ›› Issue (9): 228-233.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201309047

右旋糖苷对生姜蛋白酶的化学修饰及其酶学性质影响

张建萍，刘恩岐*，巫永华，陈尚龙

徐州工程学院江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室，江苏徐州 221008

收稿日期:2013-03-21 修回日期:2013-04-22 出版日期:2013-05-15 发布日期:2013-05-07
通讯作者: 刘恩岐 E-mail:leq@xzit.edu.cn
基金资助:
江苏省高校自然科学研究计划项目(08KJD550001)

Zingibain: Chemical Modification Using Dextran and Enzymatic Properties

ZHANG Jian-ping，LIU En-qi*，WU Yong-hua，CHEN Shang-long

Jiangsu Key Laboratory of Food Resource Development and Quality Safety, Xuzhou Institute of Technology, Xuzhou 221008, China

Received:2013-03-21 Revised:2013-04-22 Online:2013-05-15 Published:2013-05-07
Contact: LIU En-Qi E-mail:leq@xzit.edu.cn

摘要/Abstract

摘要：

以NaIO4活化的右旋糖苷为修饰剂，研究修饰反应条件对生姜蛋白酶化学修饰效果的影响与修饰前后酶学性质及构型构象的变化。结果表明：较佳修饰条件为温度42℃、pH 6.0、酶与活化右旋糖苷质量比1:22、修饰时间3h。与修饰前天然生姜蛋白酶相比，修饰酶的相对酶活力提高了2.0倍，酶蛋白氨基修饰率为57.8%。以酪蛋白为底物时，修饰酶的最适温度、最适pH值和酶反应动力学参数Km值较天然生姜蛋白酶均有所降低，热稳定性明显增强；修饰酶的紫外光谱吸收峰向长波长方向偏移，构型构象发生了变化。

关键词: 右旋糖苷, 生姜蛋白酶, 化学修饰, 酶学性质

Abstract:

Dextran was activated by sodium periodate for use as a modifying reagent in the chemical modification of
zingibain. In order to find an optimum method for chemcial modification, the effects of different modification conditions were
studied by orthogonal array design. Some enzymatic properties of natural and modified zingibain were investigated, and their
structures were investigated by ultraviolet absorption spectroscopy. The results showed that the modification rate of zingibain
using activated dextran was 57.8% and the relative enzyme activity was 2.0 times higher than that of the natural enzyme under
the conditions: the ratio of zingibain: activated dextran = 1:22 (m/m) and pH 6.0 at 42 ℃ for 3 h. Compared with the natural
enzyme, the optimal reaction temperature and pH and the Km of the modified enzyme using casein as the substrate were reduced,
and the thermostability of the modified enzyme was increased significantly. The spectral analysis showed that the configuration
and conformation of the modified enzyme were quite different from those of the natural enzyme.

Key words: dextran, zingibain, chemical modification, enzymatic properties

中图分类号:

TS253.9

张建萍，刘恩岐*，巫永华，陈尚龙. 右旋糖苷对生姜蛋白酶的化学修饰及其酶学性质影响[J]. 食品科学, 2013, 34(9): 228-233.

ZHANG Jian-ping，LIU En-qi*，WU Yong-hua，CHEN Shang-long. Zingibain: Chemical Modification Using Dextran and Enzymatic Properties[J]. FOOD SCIENCE, 2013, 34(9): 228-233.

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