黑曲霉糖化酶基因在荧光假单胞菌中的表达

食品科学 ›› 2006, Vol. 27 ›› Issue (11): 199-202.

黑曲霉糖化酶基因在荧光假单胞菌中的表达

王辉, 胡玉红, 孙文敬, 王子微, 刘敬泽

河北师范大学生命科学学院

出版日期:2006-11-15 发布日期:2011-11-28

Expression of the Glucoamylase Gene of Aspergillus niger in Pseudomonas fluorescens

WANG Hui, Hu-Yu-Hong, Sun-Wen-Jing, WANG Zi-Wei, Liu-Jing-Ze

College of Life Sciences,Hebei Normal University,Shijiazhuang 050016,China

Online:2006-11-15 Published:2011-11-28

摘要/Abstract

摘要： 黑曲霉糖化酶基因cDNA按正确的读码框架克隆到广宿主表达载体pBBR1MCS-2,构建出含黑曲霉糖化酶基因的表达载体pBBR1MCS-2GA,用三亲和接合转化法将重组质粒导入2-酮基-D-葡萄糖酸高产菌株荧光假单胞菌AR4。得到重组菌ARW4,经SDS-PAGE凝胶电泳和Westernblot分析显示,黑曲霉糖化酶基因在ARW4中得到表达,表达产物主要以不溶性包涵体形式存在。

关键词: 黑曲霉, 糖化酶基因, 荧光假单胞菌, 原核表达

Abstract: Aspergillus niger glucoamylase gene cDNA was subcloned into broad host expression vector pBBR1MCS-2 with correct reading frame to obtain recombinant vector pBBR1MCS-2GA. Then it was transformed into Pseudomonas fluorescens AR4 which was a high yield strain of 2-keto-D-gluconic acid,and obtained recombinant bacteria ARW4. SDS-PAGE gel electrophoresis and Western blot analysis showed that the recombinant glucoamylase protein had expressed effectively in ARW4,and existed in the form of inclusion which was inactive.

Key words: Aspergillus niger, glucoamylase gene, Pseudomonas fluorescens, prokaryotic expression

王辉, 胡玉红, 孙文敬, 王子微, 刘敬泽. 黑曲霉糖化酶基因在荧光假单胞菌中的表达[J]. 食品科学, 2006, 27(11): 199-202.

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