食品科学 ›› 2025, Vol. 46 ›› Issue (17): 111-108.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20250311-087
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高鹏,张胜梦,孙元伟,黄巍巍,邱益彬,徐虹,张琦,李莎
GAO Peng, ZHANG Shengmeng, SUN Yuanwei, HUANG Weiwei, QIU Yibin, XU Hong, ZHANG Qi, LI Sha
摘要: 通过优化毕赤酵母Komagataella phaffii GS115表达系统,显著提升高倍甜味蛋白Brazzein的分泌表达水平。首先成功获得重组菌株K. phaffii Bra-1,经摇瓶发酵优化,在甲醇诱导体积分数2%、生物素体积分数0.08%、温度30 ℃、初始pH 6.0的条件下,表达量达到90.2 mg/L。进一步表达元件筛选优化实验表明内源醇氧化酶1启动子(PAOX1)具有最优表达性能;αΔ57-70信号肽(SαΔ57-70)通过增强信号肽柔性使Brazzein表达量达到183.2 mg/L;共表达调控元件蛋白二硫键异构酶进一步将产量提高至209.3 mg/L。在5 L生物反应器中,调控诱导起始OD600为100、pH值恒定在5.0,通过分批补料策略使得Brazzein产量达到1.4 g/L。本研究为甜味蛋白Brazzein的规模化生产与应用奠定了基础。
中图分类号: