食品中鸡源性成分实时荧光PCR检测方法的建立

doi:10.7506/spkx1002-6630-201402048

食品科学 ›› 2014, Vol. 35 ›› Issue (2): 248-251.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201402048

食品中鸡源性成分实时荧光PCR检测方法的建立

范丽丽1，李培2，傅春玲1 ,*，丁洪流2，陈英2

1.苏州大学医学部公共卫生学院，江苏苏州 215123；2.苏州市产品质量监督检验所，江苏苏州 215128

收稿日期:2013-04-22 修回日期:2013-12-24 出版日期:2014-01-25 发布日期:2014-02-19
通讯作者: 傅春玲 E-mail:fuchunling@suda.edu.cn
基金资助:
苏州市科技支撑计划项目（SS201126）

Detection of Chicken-Derived Ingredients in Foods by Fluorescence-Based Quantitative Real-Time PCR

FAN Li-li1, LI Pei2, FU Chun-ling1,*, DING Hong-liu2, CHEN Ying2

1. School of Public Health, Medical College, Soochow University, Suzhou 215123, China;
2. Suzhou Products Quality Supervision and Inspection Institute, Suzhou 215128, China

Received:2013-04-22 Revised:2013-12-24 Online:2014-01-25 Published:2014-02-19
Contact: FU Chun-ling E-mail:fuchunling@suda.edu.cn

摘要/Abstract

摘要：

目的：建立基于实时荧光聚合酶链式反应技术的食品中鸡源性成分快速检测方法。方法：以鸡线粒体细胞色素b为目的基因，设计特异性引物和探针，通过特异性、灵敏性实验及模拟混合肉样和市售肉制品检测，对该体系进行验证。结果：该鸡源荧光聚合酶链式反应检测体系具有很好的特异性及灵敏性，可检测3.5 pg/μL鸡源DNA 的存在；经含鸡源成分的模拟混合肉样检测，证实体系抗干扰能力强；并且通过市售食品检测表明体系可用于定性加工食品中的鸡源成分。结论：所建立的鸡源引物探针体系具有特异性好、灵敏度高、快速高效等优点，可用于对食品中鸡源性成分的掺假鉴别。

关键词: 实时荧光聚合酶链式反应, 鸡, 线粒体细胞色素b基因, 食品掺假

Abstract:

Objective: This study is aimed to establish a fluorescence-based real time polymerase chain reaction (PCR) assay
for specific detection of chicken-derived ingredients in foods. Methods: A pair of primers and a Taqman probe targeting the
conservative regions of the chicken mitochondrial cytochrome b (Cyt b) gene were designed. The assay system was validated
with respect to sensitivity and specificity by detecting mixed meat samples and commercial meat products. Results: The
assay was found to be highly specific and sensitive as evidenced by showing no amplification of DNA extracted from other
meats and by its capability of detecting 3.5 pg/μL of chicken DNA. Its application for detecting mixed samples of chickenderived
ingredients and other meats showed high strong anti-interference performance. Conclusion: The PCR system offers
the advantages of high specificity and sensitivity as well as rapidity and is applicable to identify meat products adulterated
with chicken-derived ingredients.

Key words: real-time PCR, chicken, mitochondrial cytochrome b gene, food adulteration

中图分类号:

TS207.3

范丽丽1，李培2，傅春玲1,*，丁洪流2，陈英2. 食品中鸡源性成分实时荧光PCR检测方法的建立[J]. 食品科学, 2014, 35(2): 248-251.

FAN Li-li1, LI Pei2, FU Chun-ling1,*, DING Hong-liu2, CHEN Ying2. Detection of Chicken-Derived Ingredients in Foods by Fluorescence-Based Quantitative Real-Time PCR[J]. FOOD SCIENCE, 2014, 35(2): 248-251.

参考文献

[1] 刘登勇, 周光宏, 徐幸莲. 我国肉鸡加工业的现状及发展趋势[J]. 食品科学, 2005, 26(11): 266-269.

[2] 李家鹏, 乔晓玲, 田寒友, 等. 食品和饲料中动物源性成分检测技术研究进展[J]. 食品科学, 2011, 32(09): 340-347.

[3] 王玲, 姜辉, 田亚平. 普通人群14种食物不耐受情况初步分析[J]. 军医进修学院学报, 2007, 28(2): 129-131.

[4] 陈颖，吴亚君，徐宝梁，等. 食品及饲料中马属动物源性成分的PCR检测研究[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(5): 78-83.

[5] Von Holst C, Honikel KO, Unglaud W, et al. Determination of an appropriate heat treatment of animal waste using the ELISA technique: result of a validation survey[J]. Meat Science, 2000, 54: 1-7.

[6] 王小燕, 王锡昌, 刘源，等. 近红外光谱技术在食品掺伪检测应用中的研究进展[J]. 食品科学, 2011, 32(01): 265-269.

[7] Heid CA, Stevens J, Livak KJ, et al. Real time quantitative PCR[J]. Genome Research, 1996, 6: 986-994.

[8] Dooley JJ, Paine KE, Garrett SD, et al. Detection of meat species using TaqMan real-time PCR assays[J]. Meat Science, 2004, 68(3): 431-438.

[9] BALLIN N Z, VOGENSEN F K, and KARLSSON A H. Species determination – Can we detect and quantify meat adulteration[J]. Meat Science, 2009, 83(2): 165-174.

[10] 汪永信, 安虹, 程坚, 等. 双重实时荧光PCR法检测食品和饲料中的鸡源性成分[J]. 生物技术通报, 2012, 1: 134-138.

[11] Rodr?′guez D, D’Agostino, Pla M, et al. Construction Strategy for an Internal Ampli?cation Control for Real-Time Diagnostic Assays Using Nucleic Acid Sequence-Based Ampli?cation: Development and Clinical Application[J]. Journal of Clinical Microbiology, 2004, 42(12): 5832-5836.

[12] 罗家琴, 王加启, 卜登攀, 等. 饲料中牛、羊、猪、鸡源性成分的PCR检测方法及其应用. 中国农业科学, 2008, 41(7): 2112-2119.

[13] 王金玲, 贾金生, 李俊环, 等. 饲料中鸡源性成分PCR-DHPLC检测方法的建立[J]. 中国兽医学报, 2012, 32(3): 493-496.

[14] GB/T 21103-2007 动物源性饲料中哺乳动物源性成分定性检测方法实时荧光PCR方法[S].

[15] SN/T 2557-2010 畜肉食品中牛成分定性检测方法实时荧光PCR法[S].

食品中鸡源性成分实时荧光PCR检测方法的建立

Detection of Chicken-Derived Ingredients in Foods by Fluorescence-Based Quantitative Real-Time PCR

RichHTML

PDF (PC)

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价

[1]	罗祥祥，周迎芹，黄晶晶，谢宁宁，鄢嫣，陈小娥. 大蒜硫化物对油炸鸡胸肉中MeIQx的抑制机制[J]. 食品科学, 2021, 42(9): 31-38.
[2]	王冰峰，徐雷，徐贞贞，陈爱亮，杨曙明，廖小军. 液相色谱-高分辨质谱技术在食品掺假鉴别研究中的应用[J]. 食品科学, 2021, 42(7): 301-310.
[3]	李宁宁，李钊，赵圣明，马汉军，张文振，康壮丽，朱明明，王正荣，何鸿举. 地皮菜添加量对鸡胸肉糜凝胶特性的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(2): 53-59.
[4]	周凯，周干，谢勇，王兆明，李先保，周辉，徐宝才. 不同温度对调理鸡排低温贮藏品质特性的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(17): 210-217.
[5]	王珂雯，徐雷，徐贞贞，王雪，杨曙明. 基于液相色谱-四极杆飞行时间质谱方法分析冰鲜鸡肉代谢标志物[J]. 食品科学, 2021, 42(16): 293-303.
[6]	王光宇，邱伟芬，徐幸莲，周光宏. 冷鲜鸡肉中莓实假单胞菌NMC25的全基因组测序及分析[J]. 食品科学, 2021, 42(16): 233-238.
[7]	周亚军，王雪松，陈艳，王淑杰. 人参浸提液处理对烧鸡食用品质的影响[J]. 食品科学, 2021, 42(15): 66-73.
[8]	舒晓，褚能明，张雪梅，孟霞，李典晏，黄程兰，向嘉，杨俊英. 脂质去除分散固相萃取-气相色谱-串联质谱测定鸡蛋中62 种农药残留[J]. 食品科学, 2021, 42(14): 320-327.
[9]	袁湖川，刘钰，冉丽丹，杨川，罗珂煜，任旭东，王庆玲. 鸡蛋贮藏过程中蛋黄内源抗氧化组分与氧化进程的关系[J]. 食品科学, 2021, 42(13): 233-240.
[10]	柏雪，陈宇，赵立军，张静. 氟苯尼考在鸡蛋和蛋鸡组织中的残留规律及预测模型建立[J]. 食品科学, 2021, 42(13): 26-33.
[11]	王天泽，谭佳，杜文斌，甄大卫，谢建春. 北京油鸡鸡汤滋味物质分析[J]. 食品科学, 2020, 41(8): 159-164.
[12]	刘钰，赵孟斌，于浩坤，杨莉，吕兵，王庆玲. 鸡蛋贮藏过程中脂质氧化与内源酶活性的相关性[J]. 食品科学, 2020, 41(7): 198-202.
[13]	徐亦驰，彭诗怡，杨芳. 鸡蛋消费与胆固醇稳态相关性研究进展[J]. 食品科学, 2020, 41(7): 245-254.
[14]	郑艺，何亚红，何计国. 油脂对油炸食品中反式脂肪酸含量的影响[J]. 食品科学, 2020, 41(6): 58-63.
[15]	杜艳，陈复生，陈晨，刘营. 转基因检测中大豆蛋白DNA提取方法筛选及其lectin基因降解分析[J]. 食品科学, 2020, 41(4): 102-111.