食品科学 ›› 2012, Vol. 33 ›› Issue (3): 44-47.doi: 10.7506/spkx1002-6630-201203010
张永勤,王 斐,曾凡伟,王哲平,张 杰,赵 鑫,程 千
ZHANG Yong-qin,WANG Fei,ZENG Fan-wei,WANG Zhe-ping,ZHANG Jie,ZHAO Xin,CHENG Qian
摘要: 建立一种木聚糖酶活力的微量测定新方法——3-甲基-2-苯并噻唑酮腙(MBTH)法。根据木聚糖及其酶解产物的特殊性,研究MBTH法的显色条件,并以多点测定法对酶活力测定中的几个关键参数进行探讨。结果表明:蛋白质在其质量浓度低于30μg/mL时对测定无干扰;木聚糖溶液的最佳测定质量浓度为4mg/mL;较高的酶解温度会使木聚糖酶在测定过程中失活,因此,酶活力测定的最佳温度为30℃,而远低于该酶的最适温度;酶解时间为60min以内;酶解产物与MBTH试剂的反应时间应控制在13~16min之间,以15min为最佳。以酶解时间为30min计,本法检测限为0.135mU/mL,定量限为0.451mU/mL,适当延长酶解时间可相应提高酶活力检测灵敏度。该法准确度高,结果稳定,灵敏度远高于DNS法。
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