食品科学 ›› 2022, Vol. 43 ›› Issue (12): 325-328.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20210304-060
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刘健慧,张先舟,张蕴哲,李兰茹,王红静,高洁,耿凤珍,檀建新
LIU Jianhui, ZHANG Xianzhou, ZHANG Yunzhe, LI Lanru, WANG Hongjing, GAO Jie, GENG Fengzhen, TAN Jianxin
摘要: 将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T荧光信号增强的作用,达到基于G-四链体的PCR-RCA技术检测沙门氏菌(Salmonella)的目的。在优化的检测体系下,确定了沙门氏菌基因组DNA浓度对数与486 nm波长处的荧光信号强度具有良好的线性关系,回归方程为y=2.101x+2.872 3(R2=0.992 5),线性范围为17 fg/μL~1.7 ng/μL。根据实验的特异性分析,表明此方法适用于沙门氏菌属的检测,对人工污染沙门氏菌牛奶样品进行检测,检出限为4.28 CFU/mL。该方法具有特异性强、灵敏度高、检出限低等优点,为实现食源性致病菌的快速检测提供新的方法。
中图分类号: