食品科学 ›› 2022, Vol. 43 ›› Issue (20): 165-171.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20220412-137
李恩静,王丹,薛晨玉,杨红莲,耿健强,穆同娜,吴燕涛,吕莹
LI Enjing, WANG Dan, XUE Chenyu, YANG Honglian, GENG Jianqiang, MU Tongna, WU Yantao, LÜ Ying
摘要: 应用微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)技术,建立婴幼儿配方乳粉中双歧杆菌定量检测方法。以双歧杆菌的单拷贝特异性基因rpsL为目标基因设计引物探针,对ddPCR条件进行优化,考察方法的特异性、灵敏度和重复性,并与平板计数方法进行对照验证。结果表明,建立的方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。细菌纯培养液的检出限为296 CFU/mL,模拟样品检出限为7 300 CFU/g,不与10 种近缘乳酸菌发生交叉反应,且重复性较好,采用已建立的ddPCR方法和平板计数方法对市售婴幼儿配方乳粉样品进行检测,2 种方法测定值结果偏差小于10%,结果一致性较好。本研究建立的ddPCR方法对婴幼儿配方乳粉中的双歧杆菌定量检测能够更快速、灵敏、准确,具有一定的应用前景。
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