食品中五种致病性弧菌MPCR-DHPLC检测方法的建立

食品科学 ›› 2008, Vol. 29 ›› Issue (10): 500-504.

食品中五种致病性弧菌MPCR-DHPLC检测方法的建立

邵碧英, 王传得, 郑晶, 黄晓蓉, 曹际娟, 陈彬, 吴谦

福建出入境检验检疫局；福建农林大学动物科学院；辽宁出入境检验检疫局；

出版日期:2008-10-15 发布日期:2011-12-08

Development of MPCR-DHPLC Detection Method for Five Pathogenic Vibrios in Foods

SHAO Bi-Ying, WANG Chuan-De, ZHENG Jing, HUANG Xiao-Rong, CAO Ji-Juan, CHEN Bin, WU Qian

1.Fujian Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Fuzhou 350001,China; 2.College of Animal Science,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China; 3.Liaoning Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Dalian 116001,China

Online:2008-10-15 Published:2011-12-08

摘要/Abstract

摘要： 采用试剂盒法提取5种致病性弧菌(霍乱弧菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和拟态弧菌)的基因组DNA。分别合成5对特异性引物,对PCR反应体系进行优化后,建立了5种致病性弧菌间的MPCR-DHPLC检测方法。二重PCR-DHPLC检测灵敏度可达到100CFU/ml。建立的MPCR-DHPLC方法在食品中弧菌的检测上具有很好的应用价值。

关键词: 弧菌, 基因组DNA, 多重PCR, 变性高效液相色谱

Abstract: The genome DNAs of five pathogenic Vibrios were extracted by kit method,including Vibrio cholerae,V. parahaemolyticus,V. vulnificus,V. alginolyticus and V. mimicus,and their five pairs of special primers were composed,respectively. The MPCR-DHPLC detection methods among the five vibrios were developed after the PCR reaction systems were optimized. The detection sensitivity of duplex PCR-DHPLC is 100 CFU/ml. The developed MPCR-DHPLC method has good application merit on detecting the Vibrios in foods.

Key words: Vibrio, genome DNA, multiplex PCR (MPCR), denaturalization high performance liquid chromatography (DHPLC)

邵碧英, 王传得, 郑晶, 黄晓蓉, 曹际娟, 陈彬, 吴谦. 食品中五种致病性弧菌MPCR-DHPLC检测方法的建立[J]. 食品科学, 2008, 29(10): 500-504.

SHAO Bi-Ying, WANG Chuan-De, ZHENG Jing, HUANG Xiao-Rong, CAO Ji-Juan, CHEN Bin, WU Qian. Development of MPCR-DHPLC Detection Method for Five Pathogenic Vibrios in Foods[J]. FOOD SCIENCE, 2008, 29(10): 500-504.

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