食品科学 ›› 2019, Vol. 40 ›› Issue (4): 299-304.doi: 10.7506/spkx1002-6630-20180103-041
禹金龙1,董?晨2,王娴静1,姬赛赛1,付文静1,胡?洁1,江?芸1,*
YU Jinlong1, DONG Chen2, WANG Xianjing1, JI Saisai1, FU Wenjing1, HU Jie1, JIANG Yun1,*
摘要: 目的:对牛粪及牛肉中的非O157大肠杆菌进行分离、鉴定和毒力基因携带情况进行检测,以了解非O157大肠杆菌的污染状况。方法:参考USDA检测方法,对样品进行选择性增菌,用多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法进行初步筛选,检测O抗原(O157、O121、O111、O103、O26),阳性样本用选择性显色培养基rainbow agar分离纯化,可疑菌株用多重PCR方法鉴定O抗原,PCR-限制性片段长度多态性鉴定H抗原,并采用血清凝集实验进行验证,确认的阳性菌株采用多重PCR方法进行毒力基因(stx1、stx2、eae、hly)检测。结果:在153?份牛粪和49?份牛肉样本中,共40?份样品检出1?个或多个O血清型阳性,牛粪检出率高于牛肉,非O157阳性率为19.3%,O157的阳性率为0.50%;经分离纯化后,共鉴定出阳性菌株30?株,其中O26最多占73.3%,O121、O103、O157分别占16.7%、6.7%、3.3%。毒力基因检测结果显示,分离自牛肉的2?株O26:H11,一株stx1、hly阳性,另一株hly阳性,分离自牛粪的1?株O26:H11携带hly基因,因此30?株菌株中带毒菌株阳性率为10.0%,非O157产志贺毒素大肠杆菌阳性率为3.4%。结论:牛粪和牛肉中非O157大肠杆菌的污染率明显高于O157,尤其是O26:H11血清型最高,且检出含志贺毒素基因的大肠杆菌,这提示零售牛肉市场存在非O157大肠杆菌污染的安全风险,我国应该加强对非O157大肠杆菌的检测和监控。??
中图分类号: