交联β-葡萄糖苷酶聚集体的制备及其性质

食品科学 ›› 2007, Vol. 28 ›› Issue (12): 254-257.

交联β-葡萄糖苷酶聚集体的制备及其性质

罗建平, 欧杰, 潘利华

合肥工业大学生物与食品工程学院；合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009；安徽合肥230009；

出版日期:2007-12-15 发布日期:2011-11-22

Preparation and Properties of Cross-linked β-glucosidase Aggregates

LUO Jian-Ping, 欧Jie , PAN Li-Hua

School of Biotechnology and Food Engineering, Hefei University of Technology, Hefei 230009, China

Online:2007-12-15 Published:2011-11-22

摘要/Abstract

摘要： 交联酶聚集体法是一种新型的无载体酶固定化方法。本实验用该法固定化黑曲霉β-葡萄糖苷酶,对其制备条件、结构特征、酶学性质进行了研究。结果表明,β-葡萄糖苷酶酶液在冰水浴中经90%的硫酸铵沉淀30min后,以5%戊二醛水溶液进行酶聚集体交联反应,可获得较高活性的交联酶聚集体,酶活回收率达75%,对对-硝基苯基-β-D-葡萄糖苷作用的最适温度、最适pH值和Km值分别为60℃、pH4.0和4.61×10-3mol/L,与游离酶相比,表现更高的底物亲和力。将其用于大豆异黄酮活性苷元染料木素的合成,40min内对染料木苷转化率达到66%。

关键词: &beta, -葡萄糖苷酶, 交联酶聚集体, 无载体固定化, 大豆异黄酮, 应用

Abstract: Cross-linked enzyme aggregates (CLEAs) were used to immobilize β-glucosidase from Aspergillus niger. β-glucosidase was precipitated by 90% ammonium sulfate solution for 30 min at 0 ℃, then the aggregates were cross-linked by 5% glutaraldehyde solution. The obtained cross-linked β-glucosidase aggregates remained 75% of total enzyme activity. Its optimum reaction temperature, reaction pH and Km to pNPG were 60 ℃, 4.0 and 4.61×10-3 mol/L, respectively. Compared to the free β-glucosidase, the cross-linked β-glucosidase aggregates had higher affinity to the substrate. The conversion rate was 66% when cross-linked β-glucosidase aggregates were employed to genistein production from soybean isoflavone genistin in 40 min.

Key words: &beta, -glucosidase； cross-linked enzyme aggregates； carrier-free immobilization； soybean isoflavones； application；

罗建平, 欧杰, 潘利华. 交联β-葡萄糖苷酶聚集体的制备及其性质[J]. 食品科学, 2007, 28(12): 254-257.

LUO Jian-Ping, 欧Jie , PAN Li-Hua. Preparation and Properties of Cross-linked β-glucosidase Aggregates[J]. FOOD SCIENCE, 2007, 28(12): 254-257.

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